絲狀真菌叢枝菌


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    MOBIO的技術(shù)團(tuán)隊(duì)參加了芝加哥舉行的*四屆阿爾貢土壤宏基因組學(xué)會(huì)議,其中較熱的話題就是絲狀真菌。技術(shù)部的熱線響個(gè)不停,來(lái)電有許多咨詢?nèi)绾翁崛〗z狀真菌DNARNA,貌似全宇宙都在關(guān)心絲狀真菌。所以很值得在技術(shù)文章里頭占一篇只之地。

    真菌是種很有趣的微生物。有哪個(gè)物種的大小既能是一個(gè)細(xì)胞,也能長(zhǎng)到迄今為止已知地球上較大的生物體,足足占地4平方英里(在俄勒岡州的藍(lán)嶺)?對(duì)的,它是就真菌。真菌無(wú)處不在,有些是有益的,有些很美味,有些則劇毒!無(wú)論你對(duì)它有什么樣的看法,都不妨礙它們作為較頑強(qiáng)的微生物。

    是什么造就它們的頑強(qiáng)?

    是什么讓它們那么難裂解?為什么它們能承受住早該讓其它微生物化成一勺質(zhì)子和中子的加熱及珠磨研磨?它們細(xì)胞壁的成分真實(shí)其**的關(guān)鍵。真菌使用了葡聚糖和幾丁質(zhì)共同保護(hù)它們的細(xì)胞膜。幾丁質(zhì)加上鈣鹽也是昆蟲(chóng)外骨骼的重要成分,組成了甲殼動(dòng)物的保護(hù)盾。或者說(shuō)是生物水泥。


    幾丁質(zhì)是乙酰葡糖胺通過(guò)β1、4糖苷相互連接聚合而成的。該結(jié)構(gòu)還能增強(qiáng)聚合物之間的鍵連接,早就了幾丁質(zhì)的仿生強(qiáng)度。(見(jiàn)左圖)

    顯然這層細(xì)胞壁讓真菌熬過(guò)了每一個(gè)黑暗時(shí)刻。快速搜索真菌的進(jìn)化史不難找到很多有趣的信息,一句話總結(jié)下來(lái),較早具有真菌特征的化石出現(xiàn)在原生代,約1430million年前。

    回到本篇主題:教你如何提取真菌中的DNARNA。根據(jù)樣品類型,MOBIO提供多款試劑盒供選擇。

    提取純培養(yǎng)的DNARNA

    要提取純培養(yǎng)的DNA,我們建議使用含有玻璃研磨珠的PowerLyzer UltraClean Microbial DNA Isolation Kit配合機(jī)械研磨。實(shí)際上,需要一款強(qiáng)力的珠磨研磨機(jī)。渦旋儀也可以,不過(guò)我們建議在渦旋振蕩前對(duì)樣品進(jìn)行加熱水浴以增強(qiáng)破壁效果。對(duì)加入到含裂解緩沖液研磨珠套管的細(xì)胞進(jìn)行65-70水浴15min。如果你有類似于PowerLyzer這樣的強(qiáng)力珠磨研磨機(jī),就可以省略加熱步驟,但仍需要評(píng)估研磨效果,不至于研磨過(guò)頭了。

    要提取純培養(yǎng)的RNA,可試用UltraClean Microbial RNA Isolation Kit。這款試劑盒使用了碳化硅研磨珠,其擁有鋒利不規(guī)則邊緣,不但能很好裂解細(xì)胞,還能剪切基因組DNA分子。

    我們有些客戶用PowerBiofilm DNARNA試劑盒也很成功。PowerBiofilm試劑盒中的化學(xué)試劑能溶解葡聚糖,破壞富含幾丁質(zhì)的細(xì)胞壁,使細(xì)胞較容易裂解。且PowerBiofilm試劑盒的研磨珠套管使用了不同大小的研磨珠混搭,能打碎更多細(xì)胞,尤其是純培養(yǎng)的菌絲。當(dāng)然富含抑制因子的環(huán)境樣品也能用PowerBiofilm試劑盒移除。

    土壤中的真菌DNA、RNA提取

    要提取土壤中的真菌部分微生物,我們建議用含玻璃研磨珠的PowerLyzer PowerSoil DNA Isolation Kit。玻璃研磨珠較適合強(qiáng)力珠磨研磨機(jī)。了解更多不同類型研磨珠與土壤DNA提取的關(guān)系,點(diǎn)擊這里。

    要提取土壤RNA,較好的試劑盒是RNA PowerSoil Total RNA Isolation Kit。這款試劑盒結(jié)合了微生物RNA提取試劑盒的碳化硅研磨珠,還用上了基裂解緩沖液,確保微生物沒(méi)有生還機(jī)會(huì)。因?yàn)檫@款試劑盒樣品起始量是2g,讓你可以富集低微生物含量樣品的RNA。了解更多使用這款試劑盒的技巧,點(diǎn)擊這里。

    水樣濾膜

    當(dāng)然,如果你在用標(biāo)準(zhǔn)的47mm濾膜提取水樣,PowerWater DNARNA試劑盒就是你的可以選擇。

    由此可見(jiàn),樣品基質(zhì)類型與目標(biāo)微生物類型對(duì)選用試劑盒來(lái)說(shuō)同樣重要。

    其它樣品類型:

    你還會(huì)想到很多樣品類型:唾液、體液、血液培養(yǎng)物、棉拭子、糞便等等?;A(chǔ)答案就是,如果你有生物樣品需要提取真菌DNARNA,我們總有方法給到你。

    還有非常多有趣且較其重要的真菌等待進(jìn)一步研究,MOBIO實(shí)驗(yàn)室有你需要的研究工具!

     


    深圳市安必勝科技有限公司專注于試劑盒 實(shí)驗(yàn)室耗材等

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