色譜柱的構(gòu)造及性能評(píng)價(jià)——國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)資源平臺(tái)

時(shí)間：2019-02-27作者：北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司瀏覽：120

   色譜柱的構(gòu)造及性能評(píng)價(jià)——國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)資源平臺(tái)
⒈構(gòu)造
色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不**70 kg/cm2 時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm（5~10&μm），取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類(lèi)，尺寸規(guī)格也不同：
①常規(guī)分析柱（常量柱），內(nèi)徑2~5mm（常用4.6mm，國(guó)內(nèi)有4mm和5mm），柱長(zhǎng)10~30cm；
②窄徑柱（narrow bore，又稱(chēng)細(xì)管徑柱、半微柱semi-microcolumn），內(nèi)徑1~2mm，柱長(zhǎng)10~20cm；
③毛細(xì)管柱（又稱(chēng)微柱microcolumn），內(nèi)徑0.2~0.5mm；
④半制備柱，內(nèi)徑>5mm；
⑤實(shí)驗(yàn)室制備柱，內(nèi)徑20~40mm，柱長(zhǎng)10~30cm；
⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定，目的是為了避免管壁效應(yīng)。
⒉性能評(píng)價(jià)
色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外，還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下，填料粒度>20μm時(shí)，干法填充制備柱較為合適；顆粒<20μm時(shí)，濕法填充較為理想。填充方法一般有4種：①高壓勻漿法，多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充；②徑向加壓法，Waters**；③軸向加壓法，主要用于裝填大直徑柱；④干法。柱填充的技術(shù)性很強(qiáng)，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用已填充好的商品柱。
必須指出，高效液相色譜柱的獲得，裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié)，但根本問(wèn)題還在于填料本身性能的優(yōu)劣，以及配套的色譜儀系統(tǒng)的的結(jié)構(gòu)是否合理。
無(wú)論是自己裝填的還是購(gòu)買(mǎi)的色譜柱，使用前都要對(duì)其性能進(jìn)行考察，使用期間或放置一段時(shí)間后也要重新檢查。柱性能指標(biāo)包括在一定實(shí)驗(yàn)條件下（樣品、流動(dòng)相、流速、溫度）下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對(duì)稱(chēng)因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性，或分離度。一般說(shuō)來(lái)容量因子和選擇性因子的重復(fù)性在±5%或±10%以?xún)?nèi)。進(jìn)行柱效比較時(shí)，還要注意柱外效應(yīng)是否有變化。
一份合格的色譜柱評(píng)價(jià)報(bào)告應(yīng)給出柱的基本參數(shù)，如柱長(zhǎng)、內(nèi)徑、填料的種類(lèi)、粒度、色譜柱的柱效、不對(duì)稱(chēng)度和柱壓降等。


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