生物緩沖劑在生物實(shí)驗(yàn)中會(huì)經(jīng)常被用到,它們種類繁多,可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合,實(shí)際使用時(shí)就存在一定的差異,所以選好合適的緩沖劑是很有必要的;同時(shí),不同緩沖液差別也很大。德晟帶你來(lái)聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區(qū)別。
Tris-HCl緩沖液
Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,其本身為弱堿,常用有效pH在“中性”范圍,Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5;Tris-鹽緩沖液:pH=5.0~9.0。
Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)
1、 Tris-HCl緩沖液穩(wěn)定,與生理體液的相容性好(Tris-HCl與鈣、離子不會(huì)形成沉淀;相反,鹽與鈣、離子會(huì)產(chǎn)生沉淀);
2、而且相同PH,相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強(qiáng)度低,這對(duì)酶類測(cè)定尤為重要,因?yàn)榇箅x子強(qiáng)度易致有些酶失活。因此,有時(shí)用Tris-HCl代替鹽緩沖液,效果較好。
Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn):
1、溫度效應(yīng)大,如4℃時(shí)pH=8.4,37℃時(shí)pH=7.4
2、pH值受溶液濃度影響較大,稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;
3、對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。
4、易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。
HEPES緩沖液
HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。
HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn):
1、pKa值介于6.0和8.0之間;
2、在水中具有高溶解度;
3、具有膜不透性,不易穿透生物膜;
4、對(duì)生化反應(yīng)影響有限,可耐化學(xué)和酶解作用,且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀;
5、有較低的可見光和紫外光吸收;
6、離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小;
HEPES緩沖液缺點(diǎn):
1、如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí),會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2;
2、HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;
3、而配置成溶劑后,要在4℃下保存,建議在短期內(nèi)使用效果較佳;
4、HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi),不能直接長(zhǎng)時(shí)間照射陽(yáng)光。
詞條
詞條說(shuō)明
病毒載體的純化過程需要經(jīng)歷繁雜的流程,而得到的產(chǎn)物、質(zhì)粒、病毒制備物是否被污染以及病毒的感染力,這些對(duì)于病毒載體的合格率來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,合格率偏低會(huì)導(dǎo)致制造成本提升,為獲得較高的產(chǎn)量與較純凈的病毒制劑,有著許多文獻(xiàn)表明,通過選擇合適的生物緩沖劑(Tris、HEPES、Tris-HCL)可以得到非常好的解決方案。下面,便是通過文獻(xiàn)中所提而整理出來(lái)的一些信息,給予大家作為參考。1、BIS-TrisCAS
Tris鹽酸即三羥甲基甲胺-鹽酸鹽Tris-HCl緩沖液,適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)、核酸相關(guān)的研究實(shí)驗(yàn),通常用它作為緩沖液應(yīng)用在蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳實(shí)驗(yàn)中,電泳效果好分辨率高。由Tris組成的生物緩沖液,常配成pH值為6.8,7.4,8.0,8.8。其pH值隨溫度變化相對(duì)較大。一般來(lái)說(shuō),溫度每升高一度,PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-
市場(chǎng)上廣泛使用的病毒保存液主要有兩種,一種是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽,添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質(zhì),這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時(shí)溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血
TRIS、BICINE、HEPES緩沖液分別有什么優(yōu)缺點(diǎn)
生物緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)防止PH值改變的溶液,PH緩沖系統(tǒng)主要用來(lái)維持生物的正常PH值,在生理環(huán)境中起到重要的作用。在生化研究實(shí)驗(yàn)中,也常常使用緩沖液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。由于不同實(shí)驗(yàn)中所需PH值范圍不同,也有很多生物緩沖液的種類可供選擇,并且在不同的領(lǐng)域都各有優(yōu)缺點(diǎn)。以常用的幾種生物緩沖液來(lái)舉例,我們來(lái)看看生物緩沖液都各什么優(yōu)缺點(diǎn):1、TRIS-HCL緩沖液TRIS-HCL緩沖液在
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