Tris鹽酸緩沖液用于蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳

時(shí)間：2022-01-26作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：84

Tris即三羥甲胺-鹽Tris-HCl緩沖液，適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)、核酸相關(guān)的研究實(shí)驗(yàn)，通常用它作為緩沖液應(yīng)用在蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳實(shí)驗(yàn)中，電泳效果好分辨率高。

由Tris組成的生物緩沖液，常配成pH值為6.8，7.4，8.0，8.8。其pH值隨溫度變化相對(duì)較大。一般來(lái)說(shuō)，溫度每升高一度，PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-PAGE較常用的試劑。Tris可溶解核酸和蛋白質(zhì)。

SDS-PAGE是相當(dāng)普遍的聚酰胺凝膠電泳，是以聚酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的電泳技術(shù)，適合蛋白質(zhì)以及寡核苷酸的分離。聚酰胺凝膠呈微觀網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具有分子篩效應(yīng)，分為非變性聚酰胺凝膠電泳（Native-PAGE）和SDS-聚酰胺凝膠（SDS-PAGE）兩種形式。

在蛋白質(zhì)SDS－PAGE不連續(xù)電泳實(shí)驗(yàn)中，制膠緩沖液使用的是Tris－HCL緩沖系統(tǒng)，濃縮膠是pH值6.7，分離膠pH為8.9；而電泳緩沖液使用的Tris－甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮電泳凝膠中，其pH值呈弱酸性，因此甘氨酸只有很少量的會(huì)解離，其在電場(chǎng)的作用下，泳動(dòng)效率低；而氯離子卻很高，兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶，蛋白分子就介于二者之間泳動(dòng)。由于導(dǎo)電性與電場(chǎng)強(qiáng)度成反比，這一區(qū)帶便形成了較高的電壓梯度，壓著蛋白質(zhì)分子聚集到一起，濃縮為一狹窄的區(qū)帶。

當(dāng)樣品進(jìn)入分離膠后，由于膠中pH的增加，呈堿性，甘氨酸大量解離，泳動(dòng)速率增加，直接緊隨氯離子之后，同時(shí)由于分離膠孔徑的縮小，在電場(chǎng)的作用下，蛋白分子根據(jù)其固有的帶電性和分子大小進(jìn)行分離。

所以，pH對(duì)整個(gè)反應(yīng)體系的影響是至關(guān)重要的，實(shí)驗(yàn)中在排除其他因素之后仍不能很好解決問(wèn)題的情況，應(yīng)首要考慮該因素，當(dāng)然其他的因素也可以從多方面考慮。

Tris由Tris與混合制得，像氨基丁三醇、緩血酸胺、2-氨基-2-（羥）-1,等都是指的Tris，是德晟生產(chǎn)的重要原料，還可以用于其它各種緩沖液體系。


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