核酸檢測(實時熒光RT-PCR方法)是確診新冠肺炎的金標(biāo)準(zhǔn),在核酸檢測的具體流程中,核酸提取是十分關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。根據(jù)已公開報道,TRIS、胍、EDTA等試劑在核酸提取中發(fā)揮著重要的作用。
核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩類,是生命的較基本物質(zhì)之一。核酸提取是指利用物理、化學(xué)等方法將核酸從樣品中分離出來的過程,是核酸擴增、DNA片段連接、載體構(gòu)建、高通量測序等一系列分子生物學(xué)分析的前提技術(shù),是生命科學(xué)研究、生物及時應(yīng)用及基因診斷中非常重要的一項技術(shù),因此,核酸的提取具有十分重要的意義。
一般來說,核酸提取是需要多步驟的工作,首先需要對細(xì)胞、組織材料等生物樣本材料進(jìn)行破碎處理,失活核酸酶,釋放核酸,而TRIS、胍、EDTA等試劑的作用主要體現(xiàn)在釋放核酸環(huán)節(jié)。
核酸(DNA、RNA)在酸性溶液中易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。而TRIS即三羥,PH緩沖范圍:7.0-9.0,能夠維持待提取樣品裂解后釋放的核酸的穩(wěn)定性,以避免核酸的降解,提高核酸的濃度和純度。
胍是核酸酶的強抑制劑,利于從富含RNASE的組織提取完整的RNA。胍不僅能夠快速的破壞細(xì)胞膜,還能夠變性蛋白質(zhì),使得蛋白質(zhì)變性沉淀,從而讓核酸能夠擺脫蛋白質(zhì)的纏繞。
EDTA即乙二胺四,其能夠與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等金屬離子結(jié)合,可防止金屬離子激活蛋白酶,從而減少金屬離子對核酸質(zhì)量的影響。
綜上,TRIS、胍、EDTA等試劑在核酸提取過程中,能夠充分有效地裂解細(xì)胞,使細(xì)胞中的核酸能夠充分釋放,得到濃度較高的核酸,有利于提高核酸的質(zhì)量,保證后續(xù)操作的準(zhǔn)確性。近期核酸檢測需求加大,TRIS需求也進(jìn)一步增加,德晟作為專業(yè)的緩沖劑生產(chǎn)廠家,可大量提供可供核酸檢測的TRIS產(chǎn)品,能滿足各大廠商的技術(shù)要求,有需求的可聯(lián)系訂購,量大價格有優(yōu)惠!
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詞條說明
TRIS全稱?三羥甲基氨基甲烷,CAS號為77-86-1,外觀為白色結(jié)晶粉末,水溶性好,能夠與乙酸乙酯相溶,并不與乙醚、四氯化碳相溶,對銅和鋁有腐蝕作用。TRIS是一種重要的**化工原料,除了我們所知道的生物化學(xué)實驗當(dāng)中作為緩沖劑的作用外,TRIS還常常被應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域,比如用于滴眼液當(dāng)中,不過隨著社會對人的健康安全越來看重后,就會有一些質(zhì)疑TRIS在滴眼液當(dāng)中對人體是否安全的聲音,流傳
? ?很多采購卡波姆940的客戶經(jīng)常頭疼的一個問題就是找了很多卡波姆940生產(chǎn)廠家對比價格,迫于降低采購成本往往選擇了卡波姆940價格較低的那個廠家,收到貨后卻發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品品質(zhì)根本沒**,低價購買了不符合質(zhì)量要求的產(chǎn)品等于浪費了人力、物力、財力,談?wù)搩r格肯定是建立在品質(zhì)有保證的前提之下,如果品質(zhì)都沒有保證,那么給再低的價格也沒用,所以千萬不能盲目攀比價格。那么有沒有這樣一個廠家,品
吖啶酯是一類化學(xué)發(fā)光試劑,其有多種型號,吖啶酯與相關(guān)化合物被廣泛證明為優(yōu)質(zhì)的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物,吖啶酯的穩(wěn)定性以及檢測靈敏度都追趕放射性同位素和標(biāo)記特異性。根據(jù)取代基的不同,常用作化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物的吖啶取代物分為兩類:吖啶酯和吖啶磺酰胺。它們的結(jié)構(gòu)中都有共同的吖啶環(huán)。 它們的發(fā)光機理相同:在堿性H2O2 溶液中, 分子受到過氧化氫離子進(jìn)攻時, 生成不穩(wěn)定的二氧乙烷, 此二氧乙烷分解為CO2 和電子激發(fā)態(tài)
生物緩沖劑有很多類型,常用的如Tris、Bicine、鹽緩沖液等,在選擇緩沖劑的時候通常主要考慮的就是緩沖液的pH緩沖范圍和是否對實驗體系產(chǎn)生干擾,其離子強度雖然影響不大,但這一些特定實驗中還是不容忽視的。嚴(yán)格來說同一種緩沖劑的離子強度不是固定的,與特定溫度壓強下的解離常數(shù)是定值不一樣,離子強度受緩沖液的濃度以及緩沖比的影響。比如Bicine緩沖劑,其離子強度受溶液中Bicine的濃度以及解離
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