生物緩沖劑有很多類型,常用的如Tris、Bicine、鹽緩沖液等,在選擇緩沖劑的時(shí)候通常主要考慮的就是緩沖液的pH緩沖范圍和是否對(duì)實(shí)驗(yàn)體系產(chǎn)生干擾,其離子強(qiáng)度雖然影響不大,但這一些特定實(shí)驗(yàn)中還是不容忽視的。
嚴(yán)格來(lái)說(shuō)同一種緩沖劑的離子強(qiáng)度不是固定的,與特定溫度壓強(qiáng)下的解離常數(shù)是定值不一樣,離子強(qiáng)度受緩沖液的濃度以及緩沖比的影響。比如Bicine緩沖劑,其離子強(qiáng)度受溶液中Bicine的濃度以及解離的部分與完整分子的比值共同影響。但是通常使用的,不同緩沖劑的離子強(qiáng)度是有明顯差距的。
緩沖劑離子強(qiáng)度比較:
比較常見(jiàn)的就是三羥Tris,它是弱電解質(zhì),Tris緩沖液中是由氨基結(jié)合水中的電離出氧根離子,體系中不含金屬陽(yáng)離子,電離程度低,會(huì)對(duì)著體系pH的改變而改變解離平衡。而HEPES緩沖液除了電離出離子還加入了強(qiáng)電解質(zhì),所以相同條件下Tris緩沖液比HEPES緩沖液離子強(qiáng)度低。
同樣地,Tris體系中的其它緩沖劑,如Bis-Tris,Bis-Tris等也屬于離子強(qiáng)度相對(duì)較低的緩沖劑。
同條件下如果都是Tris的緩沖體系,如Tris-HCl緩沖液、Tris緩沖液或Tris甘氨酸緩沖液,由于是強(qiáng)電解質(zhì),或甘氨酸是弱電解質(zhì),所以Tris和Tris甘氨酸比Tris離子強(qiáng)度較低,適合要求較高較精密的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
相比于Tris緩沖液,鹽緩沖液通常離子強(qiáng)度就比較大,所以現(xiàn)在很多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都用Tris系列的緩沖液代替了鹽緩沖液。當(dāng)然Tris的應(yīng)用增加也不全是離子強(qiáng)度的原因,在核酸電泳緩沖液中使用Tris緩沖液的同時(shí),還會(huì)添加氯化,增加了離子強(qiáng)度和導(dǎo)電率,加快電泳速度。
其實(shí)計(jì)算緩沖溶液離子強(qiáng)度計(jì)算挺繁瑣的,大致了解緩沖液離子強(qiáng)度大小即可,如果實(shí)驗(yàn)需要配制特定離子強(qiáng)度的緩沖液,可以用網(wǎng)站或軟件上的計(jì)算工具,采購(gòu)緩沖劑原料可以找像德晟這樣的生產(chǎn)廠家。
詞條
詞條說(shuō)明
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