板培養(yǎng)試驗(yàn)
將初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)酸產(chǎn)氣的后只產(chǎn)酸或只產(chǎn)氣的試管中的培養(yǎng)物用接種環(huán)取少許,劃線接種在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基平板上,為了確保獲得分離的單菌落,須注意以下事項(xiàng):
(1)劃線間距至少相隔0.5厘米;
(2)接種釘**要稍彎;
(3)先對試管輕擊并使之傾斜,以免接種針挑取到任何膜狀物或浮渣;
(4)劃線時要用針尖的彎曲部分接觸瓊脂培養(yǎng)基平面.以免刮傷或戳破培養(yǎng)基。劃線后培養(yǎng)皿倒置,于37℃培養(yǎng)18~24h。
24h后,觀察在平板上出現(xiàn)的單個菌落,其**有深綠色金屬光澤者為較典型的大腸菌群菌落。盡可能挑取典型的或接近典型的大腸菌群菌落,在營養(yǎng)瓊脂斜面上劃線,置37℃培養(yǎng)24h。挑取斜面培養(yǎng)物制成涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,凡屬革蘭氏陰性桿菌,即確認(rèn)了大腸菌群細(xì)菌的存在.
(四)復(fù)發(fā)酵驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)z
經(jīng)上述經(jīng)染色為革蘭氏陰性的典型菌落,用接種環(huán)刮取部分接種于盛有乳糖培養(yǎng)基的試管中,在37℃培養(yǎng)24h,陽性反應(yīng)者即確認(rèn)為大腸菌群細(xì)菌。
結(jié)果計算jsgfjc8788199
在初發(fā)酵試驗(yàn)中,可能有較少數(shù)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)氣的非大腸菌群細(xì)菌混在陽性可疑反應(yīng)管中,通過對初發(fā)酵中的陽性可疑管進(jìn)行平板和復(fù)發(fā)酵試驗(yàn),并進(jìn)行革蘭氏染色和細(xì)菌形態(tài)的觀察,可將那些少量的非大腸菌群細(xì)菌(“假陽性管”)刪除去,故在記錄時只能把三步試驗(yàn)都呈陽性的試管計入陽性反應(yīng)管。
如果初發(fā)酵接種水樣量為10mL、1mL、0.1mL,可直接查表求出原水樣100mL中大腸菌群指數(shù)(MPN)。如果接種水樣量**上述水樣量,則經(jīng)下面的換算式計算。
目前我國系以1L水樣中的菌數(shù)為報告值,即為MPN×10。
水樣的總大腸菌群檢索表
出現(xiàn)陽性反應(yīng)的試管數(shù) | 每100ml中的細(xì)菌的MPN | 出現(xiàn)陽性反應(yīng)的試管數(shù) | 每100ml中的細(xì)菌的MPN | ||||
10ml管 | 1ml管 | 0.1ml管 | 10ml管 | 1ml管 | 0.1ml管 | ||
0000 | 0000 | 0123 | 0245 | 0000 | 2222 | 0123 | 4679 |
0000 | 1111 | 0123 | 2467 | 0000 | 3333 | 0123 | 67911 |
0000 | 4444 | 0123 | 891113 | 1111 | 3333 | 0123 |
8101213 |
詞條
詞條說明
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