厭氧培養(yǎng)箱的操作說(shuō)明

    厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)難生長(zhǎng)的厭氧生物在大氣中操作時(shí)接觸氧而死亡的危險(xiǎn)性。

    1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,應(yīng)避免陽(yáng)光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備,放置平穩(wěn);

    2. 將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當(dāng)位置;

    3. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合;

    一、厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成:

    1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無(wú)毒塑料袋;

    2. 通電源開(kāi)照明燈,開(kāi)溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度及溫度;

    3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);

    4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén),并抽真空校驗(yàn);

    5. 操作室內(nèi)次置換(氮?dú)庵脫Q):

    A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋;

    B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y1,使二只塑料袋充足氮?dú)?,關(guān)閉閥門(mén)1,然后扎緊袋口;

    C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;

    D. 把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸放于操作室內(nèi),至全部放出。

    6. 操作室二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過(guò)程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。

    7. 操作室三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

    A. 調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時(shí)取樣室先抽真空,并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣;

    B. 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣閥并打開(kāi)閥5,使混合氣經(jīng)過(guò)流量計(jì),調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10ml左右;

    C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);

    D. 通過(guò)三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。

    8. 操作室內(nèi)打開(kāi)粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后開(kāi)美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;

    9. 開(kāi)紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。

    2、菌種的置入和培養(yǎng):

    1. 檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊之;

    2. 打開(kāi)取樣室外門(mén),將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén);

    3. 取樣室充氮置換三次過(guò)程:打開(kāi)真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y2進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。二次重復(fù)操作一次。三次操作時(shí),使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開(kāi)閥4進(jìn)混合氣,使指針回復(fù)零位,后掉閥4。取樣室充氮置換三次過(guò)程結(jié)束;


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  • 詞條

    詞條說(shuō)明

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