發(fā)熱門診日常檢測 醫(yī)院空氣微生物檢測的方法
當(dāng)下常見的檢測方法是自然沉降法、撞擊法、過濾法、液體撞擊法等。各種方法各有優(yōu)缺。我們應(yīng)根據(jù)不同的需求選擇不同的采樣方法和采樣器。
2.1 自然沉降法
常用的有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基等。面積為100平方厘米的平板培養(yǎng)基,暴露于空氣中5min,與37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后所生長的菌落數(shù)相當(dāng)于10L空氣中的菌落數(shù)。根據(jù)消毒技術(shù)規(guī)范在靠墻布點時,距墻1m。室內(nèi)50m2的房間用3點法,室內(nèi)≥50m2的用5點法。采樣所用的營養(yǎng)瓊脂統(tǒng)一配制,質(zhì)量控制整個采樣過程嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。根據(jù)奧梅梁斯的建議,空氣中細(xì)菌數(shù)(cfu/平方米)=5000N/AT,N-平均菌落數(shù)(cfu/皿)、A-平板面積(平方厘米)、T-暴露時間(min)。
此方法簡單方便,易操作,可以挑取單個進行再培養(yǎng)鑒定細(xì)菌的種類,也可檢測出致病菌在醫(yī)院空氣中的濃度,但檢測周期長,穩(wěn)定性差,受外界人流氣流等影響因素大,誤差大,可以檢測到的粒子大小也有限。并且現(xiàn)在這個傳統(tǒng)的計算公式的準(zhǔn)確性也存在爭議。
2.2 撞擊法
撞擊法較主要用的是Anderson采樣器。它的原理是:多級篩孔型采樣器,六級多孔采樣器分6級,每級400個孔,孔徑分別為1.18mm、0.91mm、0.71mm、0.53mm、0.34mm、0.25mm,各級采集粒徑分別為**級7.0um、*二級4.7-7.0um、*三級3.3-4.7um、*四級2.1-3.3um、*五級1.1-2.1um、*六級0.65-1.1um,空氣流速介于1.08~23.29 m/s之間,通過慣性撞擊將空氣中不同粒徑大小的微生物氣溶膠粒子分別捕獲在相應(yīng)固體培養(yǎng)基上,接種到平皿計數(shù)串級撞式采樣方式,通過稱量各級濾紙做增加的重量來判斷各級微粒所占比例。
Anderson采樣器平皿計數(shù):
空氣含菌數(shù)(cfu/平方米)=[六級采樣板的總菌數(shù)(cfu)/28.3(Lmin)采樣時間]
計算空氣中微生物大小分布:各級微生物粒子數(shù)/六級總菌數(shù)
此方法采集粒譜范圍廣,基本不受氣流影響,采集效率高,逃逸少,很好地模擬了人類呼吸道的解剖學(xué)結(jié)構(gòu)和空氣動力學(xué)特征,但對于清潔度較高的地方,不適宜進行長時間大采集(培養(yǎng)基表面長時間吹會干燥,黏附細(xì)菌的指數(shù)會下降)。研究表明二級篩孔式微生物采樣器與六級篩孔式微生物采樣器的采菌率基本一致。二級篩孔式微生物采樣器適用于測定空氣中細(xì)菌總數(shù)采樣,六級篩孔式微生物采樣器較適用于空氣細(xì)菌粒徑大小研究使用。 2.3 過濾法
一定量的空氣通過吸附劑(一般采用以滅菌的生理鹽水)然后培養(yǎng)吸附劑中的細(xì)菌,計算出菌落數(shù)。**械過濾法、吸附法、靜電法負(fù)離子和等離子體法、靜電駐級過濾法等。過濾器的過濾層捕集微粒的作用主要有攔截效應(yīng)、慣性效應(yīng)、擴散效應(yīng)、重力效應(yīng)、靜電效應(yīng)。此方法采集的優(yōu)點是準(zhǔn)確有效,但過程較復(fù)雜。
2.4 液體撞擊法
和固體撞擊式采樣器一樣,是利用噴射氣流方式將空氣中的微生物粒子采集在小體積液體中,液體撞擊式采樣器在采樣過程中因氣流沖擊和采樣液的攪動,可以把微生物粒子團中的多個微生物釋放出來,均勻分布在采樣液中。
適用于高濃度的空氣微生物采樣。捕獲率高,對于小粒子微生物尤為敏感。采樣液有保護作用對微弱的微生物(如病毒、立克次體)也能采樣。檢測結(jié)果較準(zhǔn)確,液體撞擊式采樣器結(jié)構(gòu)簡單使用方便,易消毒可反復(fù)使用。
綜上所述,在空氣采樣器器缺乏的情況下,想要檢測出醫(yī)院空氣的污染情況,較好選用自然沉降法,在某些特定情況下血瓊脂培養(yǎng)基**普通瓊脂培養(yǎng)基。在實驗儀器充足且豐富的情況下,只檢測數(shù)目或?qū)αW哟笮》旨墪r,較好選擇Anderson采樣器,在其他等對數(shù)目檢測率要求較高的檢測時,較好選擇液體撞擊法。
為了了解微生物的在醫(yī)院室內(nèi)空氣中的數(shù)量,種類以及分布狀況。我們今后研究應(yīng)從以下幾方面入手,首先,我們要明確目的。是要對科室的空氣整體評估,還是調(diào)查出醫(yī)院內(nèi)那些科室一般會在院內(nèi)感染那些微生物,作為目的菌。其次,根據(jù)目的確定方案。當(dāng)要對院內(nèi)整體情況分析的時,了解好各個采樣器的優(yōu)缺,進行選擇并制定方案;當(dāng)要對某科室的某種微生物進行檢測時,參考文獻(xiàn)查明目的菌的大小、運動情況,在不同培養(yǎng)基中的生長狀況,根據(jù)其特性選取不同的采樣器或者培養(yǎng)基等,做一些全國性的時間較長的大數(shù)據(jù),進行感染率評估。
詞條
詞條說明
GMP環(huán)境檢測 藥品GMP廠房潔凈室檢測驗收藥品GMP廠房潔凈室檢測驗收檢測參數(shù):風(fēng)量(換氣次數(shù))或風(fēng)速、靜壓差、懸浮粒子數(shù)、氣流流型、溫度、相對濕度、噪聲、照度高效過濾器(PAO)檢漏、自凈時間、臭氧濃度普遍要求要有全面的潔凈相關(guān)檢測能力,可為藥品GMP車間、電子無塵車間、食品藥品包裝材料車間、無菌醫(yī)療器械車間、醫(yī)院潔凈手術(shù)室、生物普遍實驗室、保健食品GMP車間、化妝品/消車間、動物實驗室、獸藥
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