真菌毒素黃曲霉素?zé)晒舛繖z測步驟

    黃曲霉素檢測所需儀器

    天平、離心機(jī)、渦旋振蕩器、恒溫孵育器、熒光讀數(shù)儀、微量移液器、兩毫升離心管、黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測卡、配套的移液器洗頭、試管架、量筒等

    黃曲霉毒素提取液配置


    用量筒量取無水乙醇和蒸餾水按照1:1的體積比進(jìn)行配置。
    首先用250ml毫升量筒量取200ml無水乙醇導(dǎo)入配置50%乙醇水的瓶子里
    在量取200ml毫升蒸餾水倒入50%乙醇水容器中,搖勻即可。
    注:單獨量取無水乙醇和蒸餾水,不能定容的方式來配置。

    黃曲霉毒素試劑盒組成

    說明書及IC卡、稀釋液和5桶黃曲霉菌毒素?zé)晒舛繖z測試紙條

    黃曲霉毒素檢測前準(zhǔn)備

    樣本前處理,取≥1千克代表性樣本,進(jìn)行粉碎過20目篩混合均勻
    孵育器需要提前10-15分鐘開機(jī)預(yù)熱。

    黃曲霉毒素樣本提取


    稱取粉碎好的樣品5g倒入50ml離心管中
    注意:稱量允許誤差是±1%,即4.95-5.05g之間。
    用50ml量筒量取40ml50%乙醇水到50ml離心管中。
    3000轉(zhuǎn)/分 渦旋振蕩器震蕩提取5分鐘
    注:要求混勻充分,否則提取效率低,可能造成檢測結(jié)果不準(zhǔn)確
    樣品量比較多的話,可以手搖顛倒混勻10分鐘來提取?;蛘?20轉(zhuǎn)/分鐘搖床上震蕩提取10分鐘。
    提取完后室溫靜置3分鐘。

    黃曲霉毒素樣本稀釋


    靜置過程中可以提前把2ml離心管做好標(biāo)記準(zhǔn)備好。
    把1000ul移液器調(diào)整到450ul,移取450ul稀釋液到2ml離心管中。
    然后把200ul移液器調(diào)至50ul。
    移取50ul靜置好的上清液到2ml離心管中
    蓋好蓋子渦旋震蕩或手搖10秒。
    將混勻后的離心管對稱的放入離心機(jī)中,4000轉(zhuǎn)離心5分鐘或7000轉(zhuǎn)離心1分鐘即可。
    離心完把離心管取出放到試管架上待用。

    黃曲霉毒素樣本的孵育及反應(yīng)


    把卡托從孵育器中取出,把所需檢測的卡條裝入,裝卡條時注意對應(yīng)通道位置,如圖所示,通道1是黃曲霉。通道2是嘔吐毒素,通道3是玉米赤霉烯酮。裝好后把卡托放入到孵育器卡槽內(nèi),把孵育器上蓋翻開,把對應(yīng)項目的微孔放入到底托,調(diào)移液器到200ul,用200ul移液器把離心后的上清液加入微孔中,加完液體蓋上黑色蓋子孵育5分鐘,把排槍調(diào)到100ul待用,計時結(jié)束后把移液器裝好吸頭放入到微孔中反復(fù)吹打混勻30-40次。(注:吹打時需參照視頻所示操作,避免產(chǎn)生大量氣泡)吹打混勻完后蓋上黑色蓋子孵育3分鐘,3分鐘后把孵育器合實,孵育5分鐘(精確計時),

    黃曲霉毒素樣本讀數(shù)


    打開讀數(shù)儀左側(cè)電源鍵直到儀器彈出登陸界面,初始賬號及密碼:admin用觸控筆錄入登陸界面,把試劑盒里面的IC卡取出來分別掃描錄入到儀器中,(注:IC卡上的批號必須和所用試劑盒的批號一致,不同批次的不能混用)。IC卡掃描完畢后點擊*二個圖標(biāo)進(jìn)行讀數(shù)界面設(shè)置,把讀數(shù)界面左下角的通道1-3對應(yīng)卡條選擇好項目,A/B選項的位置全部選擇B。五分鐘計時結(jié)束后把所有反應(yīng)中的卡托全部取出,放入到儀器右下角的倉內(nèi),放置好后點讀值即可,(注:有顏色的部分朝上,卡托放入位置如視頻所示要在1分鐘之內(nèi)讀數(shù),**過1分鐘檢測結(jié)果無效),該界面為讀數(shù)完畢后的數(shù)據(jù)呈現(xiàn)可在此處打印數(shù)據(jù),此為打印出來的數(shù)據(jù)展示
    天津龍科新域生物技術(shù)有限公司專注于嘔吐毒素檢測試劑盒,黃曲霉毒素檢測試劑盒,玉米赤霉烯酮檢測,真菌毒素檢測,霉菌毒素檢測大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子,大豆抗原檢測,霉菌毒素檢測儀等

  • 詞條

    詞條說明

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