百螢課堂之活性氧Cell Meter線粒體羥基自由基檢測試劑盒適用儀器

時(shí)間：2024-09-23作者：西安百螢生物科技有限公司瀏覽：4

一、百螢活性氧Cell Meter線粒體羥基自由基檢測試劑盒簡介

 

細(xì)胞內(nèi)羥基自由基的檢測對于理解適當(dāng)?shù)募?xì)胞氧化還原調(diào)節(jié)及其失調(diào)對各種病理的影響至關(guān)重要。羥基（HO·）是與其他分子高度反應(yīng)的活性氧（ROS）之一，以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定性。通常，羥基被認(rèn)為是氧化代謝的有害副產(chǎn)物，其可以在生命系統(tǒng)中引起分子損傷。它顯示平均壽命為10-9秒，可以與幾乎所有生物分子如核DNA，線粒體DNA，蛋白質(zhì)和膜脂質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。  MitoROS OH580是活細(xì)胞滲透探針，可以快速和選擇性地靶向活細(xì)胞中的羥基自由基。當(dāng)它與OH·反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生紅色熒光，并且可以在Ex / Em = 540 / 590nm處容易地讀取。 Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒提供靈敏的熒光探針，可在孵育1小時(shí)后檢測活細(xì)胞中的OH·。




圖1.使用MitoROS? OH580對HeLa細(xì)胞中的羥基自由基進(jìn)行熒光成像。將HeLa細(xì)胞在37℃下與MitoROS? OH580工作溶液孵育1小時(shí)，然后用HHBS清洗一次。Fenton反應(yīng)：然后將細(xì)胞在37℃下用1X HBSS緩沖液中加入10 μM CuCl2和100 μM H2O2處理1小時(shí)。對照組：HeLa細(xì)胞在1X HBSS緩沖液中不進(jìn)行處理。用HHBS清洗3次后，用TRITC濾光片（紅色）熒光顯微鏡測量HeLa細(xì)胞。用Hoechst 33342（17530，藍(lán)色）對細(xì)胞核進(jìn)行染色。









圖2.使用MitoROS?OH580 (Cat#16055)檢測RAW 264.7細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)羥基自由基。細(xì)胞用MitoROS?OH580工作液在37℃下孵育1小時(shí)，然后用HHBS洗滌一次。然后將細(xì)胞在37℃的生長培養(yǎng)基中不加或加PMA (phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯，10 ~ 500 ng/mL)孵育4小時(shí)。用HHBS洗滌3次后，使用帶TRITC濾光片的熒光顯微鏡檢測HeLa細(xì)胞。









圖3. 抗氧化劑NAC部分且顯著地逆轉(zhuǎn)了H2O2介導(dǎo)的FLS1細(xì)胞ERK1/2磷酸化的增加。（A）細(xì)胞在（Aa）無H2O2（500 μM）或（Ab）有H2O2（500 μM）條件下培養(yǎng)24小時(shí)，然后用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)的OH?產(chǎn)生情況。使用Cell Meter?線粒體羥基自由基（OH?）檢測試劑盒在熒光顯微鏡下檢測FLS1細(xì)胞中的羥基自由基。




二、百螢活性氧Cell Meter線粒體羥基自由基檢測試劑盒適用儀器

 

熒光酶標(biāo)儀

Ex:	540nm
Em:	590nm
Cutoff:	570nm
推薦孔板:	黑色透明底板
讀取模式:	底讀模式


 

 

熒光顯微鏡

Ex:	Cy3/TRITC濾波片組
Em:	Cy3/TRITC濾波片組
推薦孔板:	黑色透明底板





    




  








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