微生物限度檢測原理

時(shí)間：2024-12-30作者：杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司瀏覽：188

微生物的檢測，無論在理論研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐中都具有重要的意義，本文對生長量測定法、微生物計(jì)數(shù)法、生理指標(biāo)法和商業(yè)化微生物檢測簡要介紹了利用微生物重量，體積，大小，生理代謝物等指標(biāo)的二十余種常用的檢測方法，簡要介紹了這些方法的原理，應(yīng)用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)。
一個(gè)微生物細(xì)胞在合適的外界條件下，不斷的吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并按自己的代謝方式進(jìn)行新陳代謝。如果同化作用的速度**過了異化作用，則其原生質(zhì)的總量（重量，體積，大?。┚筒粩嘣黾?，于是出現(xiàn)了個(gè)體的生長現(xiàn)象。如果這是一種平衡生長，即各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L時(shí)，則達(dá)到程度后就會發(fā)生繁殖，從而引起個(gè)體數(shù)目的增加，這時(shí)，原有的個(gè)體已經(jīng)發(fā)展成一個(gè)群體。隨著群體中各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長，就引起了這一群體的生長，這可從其體積、重量、密度或濃度作指標(biāo)來衡量。微生物的生長不同于其他生物的生長，微生物的個(gè)體生長在科研上有困難，通常情況下也沒有實(shí)際意義。微生物是以量取勝的，因此，微生物的生長通常指群體的擴(kuò)增。微生物的生長繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下的綜合反映。因此生長繁殖情況就可作為研究各種生理生化和遺傳等問題的重要指標(biāo)，同時(shí)，微生物在生產(chǎn)實(shí)踐上的各種應(yīng)用或是對致病，霉腐微生物的防治都和他們的生長抑制緊密相關(guān)。所以有必要介紹一下微生物生長情況的檢測方法。既然生長意味著原生質(zhì)含量的增加，所以測定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù)，而測定繁殖則都要建立在計(jì)數(shù)這一基礎(chǔ)上。微生物生長的衡量，可以從其重量，體積，密度，濃度，做指標(biāo)來進(jìn)行衡量。
1. 微生物計(jì)量法
1.1 體積測量法
又稱測菌絲濃度法，通過測定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是，取量的待測培養(yǎng)液（如10 mL）放在有刻度的離心管中，設(shè)定的離心時(shí)間（如5 min）和轉(zhuǎn)速（如5000 rpm），離心后，倒出上清夜，測出上清夜體積為v，則菌絲濃度為（10-v）/10。菌絲濃度測定法是大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長的一個(gè)重要監(jiān)測指標(biāo)。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設(shè)定一致的處理?xiàng)l件，否則偏差很大，由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養(yǎng)物，結(jié)果會有偏差。
稱干重法
可用離心或過濾法測定。一般干重為濕重的10~20%。在離心法中，將體積待測培養(yǎng)液倒入離心管中，設(shè)定的離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速，進(jìn)行離心，并用清水離心洗滌1~5次，進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用紅外線烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后稱重。如用過濾法，絲狀真菌可用濾紙過濾，細(xì)菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾后用少量水洗滌，在40 ℃下進(jìn)行真空干燥。稱干重發(fā)法較為煩瑣，通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時(shí)，常采用這種方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。
1.3 比濁法
微生物的生長引起培養(yǎng)物混濁度的增高。通過紫外分光光度計(jì)測定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。對某一培養(yǎng)物內(nèi)的菌體生長作定時(shí)跟蹤時(shí)，可采用一種特制的有側(cè)臂的三角燒瓶。將側(cè)臂插入光電比色計(jì)的比色座孔中，即可隨時(shí)測定其生長情況，而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長監(jiān)測。如使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計(jì)，在波長600 nm處用比色管定時(shí)測定發(fā)酵液的吸光光度值OD600，以此監(jiān)控E.coli的生長及誘導(dǎo)時(shí)間。
1.4 菌絲長度測量法
對于絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養(yǎng)基上測定時(shí)間內(nèi)菌絲生長的長度，或是利用一只一端開口并帶有刻度的細(xì)玻璃管，到入合適的培養(yǎng)基，臥放，在開口的一端接種微生物，一段時(shí)間后記錄其菌絲生長長度，借此衡量絲狀微生物的生長。
2. 微生物計(jì)數(shù)法
2.1 血球計(jì)數(shù)板法
血球計(jì)數(shù)板是一種有結(jié)構(gòu)刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四條溝和兩條嵴，*有一短橫溝和兩個(gè)平臺，兩嵴的表比兩平臺的表面高0.1 mm，每個(gè)平臺上刻有不同規(guī)格的格網(wǎng)，*0.1 mm2面積上刻有400個(gè)小方格。通過油鏡觀察，統(tǒng)計(jì)大格內(nèi)微生物的數(shù)量，即可算出1 mL菌液中所含的菌體數(shù)。這種方法簡便，直觀，快捷，但只適宜于單細(xì)胞狀態(tài)的微生物或絲狀微生物所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且所得是包括死細(xì)胞在內(nèi)的總菌數(shù)。
2.2 染色計(jì)數(shù)法
為了彌補(bǔ)一些微生物在油鏡下不易觀察計(jì)數(shù)，而直接用血球計(jì)數(shù)板法又無法區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞的不足，人們發(fā)明了染色計(jì)數(shù)法。借助不同的染料對菌體進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜旧梢暂^方便的在顯微鏡下進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。如酵母活細(xì)胞計(jì)數(shù)可用美藍(lán)染色液，染色后在顯微鏡下觀察，活細(xì)胞為無色，而死細(xì)胞為藍(lán)色。
2.3 比例計(jì)數(shù)法
將已知顆粒（如霉菌孢子或紅細(xì)胞）濃度的液體與一待測細(xì)胞濃度的菌液按比例均勻混合，在顯微鏡視野中數(shù)出各自的數(shù)目，即可得未知菌液的細(xì)胞濃度。這種計(jì)數(shù)方法比較粗放。并且需要配制已知顆粒濃度的懸液做標(biāo)準(zhǔn)。
2.4 液體稀釋法
對未知菌樣做連續(xù)十倍系列稀釋，根據(jù)估計(jì)數(shù)，從適宜的三個(gè)連續(xù)的10倍稀釋液中各取5 mL試樣，接種1 mL到3組共15只裝培養(yǎng)液的試管中，經(jīng)培養(yǎng)后記錄每個(gè)稀釋度出現(xiàn)生長的試管數(shù)，然后查大或然數(shù)表MPN（Most Probable Number）得出菌樣的含菌數(shù)，根據(jù)樣品稀釋倍數(shù)計(jì)算出活菌含量。該法常用于食品中微生物的檢測，例如飲用水和牛奶的微生物**檢查。
杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司專注于全自動氮吹儀,一體化蒸餾儀,光化學(xué)反應(yīng)儀,氮?dú)獍l(fā)生器,分子蒸餾儀等, 歡迎致電 17366658694

• 詞條

  詞條說明

• 索式提取器實(shí)驗(yàn)前期需要準(zhǔn)備什么

  脂肪測定儀的操作步驟及注意事項(xiàng)在脂肪測定中，大多數(shù)是根據(jù)索氏抽提原理、用重量法來測定脂肪含量，用于測定脂肪含量的儀器叫做脂肪測定儀。川一脂肪測定儀操作簡單，可以批量處理，為需要批量前處理或者測定的用戶節(jié)省了大量人力物力。脂肪測定儀雖然使用簡單，但仍需熟練掌握測試過程，否則會影響到樣品脂肪的后含量。操作步驟具體如下：?1. 前期準(zhǔn)備1）測試樣品應(yīng)干燥后研細(xì)，定量稱取后裝入濾紙筒，裝樣品

• 噴霧干燥塔原理（實(shí)驗(yàn)室小型噴霧干燥機(jī)

  工作原理是空氣通過過濾器和加熱器，進(jìn)入干燥塔**部的空氣分配器，然后呈螺旋狀均勻地進(jìn)入干燥室。料液由料液槽經(jīng)過濾器由泵送至干燥塔**的離心霧化器，使料液噴成小的霧狀液滴，料液與熱空氣并流接觸，水份*蒸發(fā)，在短的時(shí)間內(nèi)干燥為成品。成品由干燥塔底部和旋風(fēng)分離器排出，廢氣由風(fēng)機(jī)排出。1 特點(diǎn)：1.1 干燥速度快。料液經(jīng)離心噴霧后，表面積大大增加，在高溫氣流中，瞬間就可蒸發(fā)95%-98%的水份，完成干燥時(shí)間

• 分子蒸餾儀在蘆薈維生素提取中的應(yīng)用

  分子蒸餾技術(shù)在蘆薈維生素提取中的應(yīng)用維生素是與人們生活息息相關(guān)的產(chǎn)品，現(xiàn)已成為醫(yī)藥與市場的主要大宗產(chǎn)品之一。維生素E用量，其次是維生素A、維生素C、維生素D等。隨著經(jīng)濟(jì)的增長和人們生活水平的提高，維生素類產(chǎn)品的需求也會進(jìn)一步增長，人們對其質(zhì)量和檔次的要求也會進(jìn)一步提高，因此，作為許多種維生素生產(chǎn)中的重要分離技術(shù)--分子蒸餾技術(shù)也會在維生素工業(yè)中發(fā)揮越來越重要的作用。1、 分子蒸餾技術(shù)的基本原理分子

• 的殘留**標(biāo)與否如何檢測

  添加劑的出現(xiàn)是造福人類的，而如今，作為食品添加劑發(fā)揮著漂白劑、防腐劑還有抗氧化劑的功能。但是一些不法商販，為了過渡追求食物的鮮艷色澤和延長存放時(shí)間，過量使用，會使食物的殘留**標(biāo)，就會對身體造成不佳影響。如果過量使用、濫用就會危害身體健康。不過，只要?dú)埩粼谑澄镏械牟?*標(biāo)，只要科學(xué)的合理使用，就不用擔(dān)心。那么問題來了，怎樣才能知道的殘留是否符合國家標(biāo)準(zhǔn)？又該拿什么儀器來檢測的殘留呢？很多用戶還在采用玻