隨著工業(yè)的迅速發(fā)展和人民生活水平的進步,人們對環(huán)境和自我健康日益注重,特別是SARS和禽流感后,人們愈加注重抗菌劑及抗菌產(chǎn)品的開發(fā)和研發(fā)。因為抗菌劑和抗菌產(chǎn)品的多樣性,很難用統(tǒng)一的辦法來點評其實在的抗菌作用。了解國內(nèi)世界抗菌產(chǎn)品和滅菌劑的檢測辦法,有助于企業(yè)正確和科學點評產(chǎn)品抗菌功能,進步產(chǎn)品的競爭性。
術(shù)語
抑菌:防止或按捺微生物成長繁衍的作用;
滅菌:殺死微生物營養(yǎng)體和繁衍體的作用;
滅菌值(率):菌和樣品觸摸必定時刻前后活菌對數(shù)值之差或菌削減百分比。
抑菌值(率):菌和規(guī)范樣品及已處理的抗菌樣品觸摸必定時刻后的活菌對數(shù)值之差,或菌削減百分比;
1. 抗菌劑的檢測
1.1抗菌劑的分類
抗菌劑:指能夠在必定時刻內(nèi),使某些微生物(細菌、真菌、酵母菌、藻類及病毒等)的成長或繁衍保持在必要水平以下的化學物質(zhì)。
抗菌劑大致分為**抗菌劑和無機抗菌劑兩大類:
無機抗菌劑以銀、鋅、銅等為主質(zhì)料,以無機填料為載體,制成無機抗菌劑,耐高溫功能好;有**抗菌劑以酯類、醇類、酚類為主要質(zhì)料,耐高溫性較低,一般在200℃以下,個別為300℃,滅菌時刻短,偶有析出等現(xiàn)象。
1.2抗菌劑的檢測
抗菌劑的查驗辦法也是有很多種, 常見的點評辦法為較小抑菌濃度(MIC)和較小滅菌濃度(MBC)
1.2.1試管法
長處:操作簡單,對儀器沒有太嚴格要求
缺陷:判別成果的人為因素大,不夠精準,樣品用量大;
在消毒技術(shù)規(guī)范里面有介紹。
將樣品稀釋成不同濃度,加入到無菌試管中,在每個試管中加入必定濃度的測驗菌,培育必定時刻后肉眼調(diào)查培育液的混濁狀況,如果是弄清的,闡明沒有細菌的增加,即細菌的成長得到了按捺。然后將一切弄清管都分別劃線在培育基外表,若無細菌成長,則闡明測驗的菌現(xiàn)已被殺滅。以此來判別該樣品的較小滅菌濃度和較小抑菌濃度。
樣品A測驗菌種金黃色葡萄球菌ATCC 6538Con.MIC6.25ppmC/C/C3.12ppmC/C/T1.56ppmT/T/T0.78ppmT/T/T樣品A試管法MIC成果:3.12ppm
1.2.2 96孔板-酶標儀法
長處:機器判讀成果,精準度高,樣品量少;
缺陷:對試驗室儀器要求較高;
能夠依據(jù)不同的樣品挑選不同的辦法,針對比較寶貴的樣品,或樣品量少的狀況,能夠選用96孔板的辦法,這個辦法對樣品的用量很少,終究的成果是用酶標儀來讀取OD值,相對而言,比用肉眼調(diào)查弄清度來得較為精準。
將樣品稀釋到測驗開始濃度后進行用多通道移液槍移取到96孔板中,然后對樣品順次進行對倍稀釋,稀釋完畢后加入測驗進行培育,培育后上酶標儀讀取OD值,未成長的濃度點即為該樣品MIC值;將一切未成長的濃度梯度孔劃線別離于固體培育基上并培育,無菌落成長的濃度即為該樣品的MBC值。
96-孔板法
樣品A (金黃色葡萄球菌ATCC 6538 )
(ppm)Blank6.253.121.560.78Growth ControlA0.0460.0480.0480.1660.2250.215B0.0470.0460.0480.1630.2420.218C0.0470.0460.0470.1660.2080.206D0.0460.0470.0460.1810.2270.211E0.0490.0470.0470.1730.2040.218F0.0460.0450.0460.1620.2180.205G0.0470.0450.0450.1680.2080.213H0.0470.0430.0440.1670.2180.208樣品A 96孔板法MIC成果:3.12ppm
比較上述兩種辦法:
1) 96孔板法的樣品用量僅為試管法的1/6。針對一些比較寶貴的樣品可挑選96孔板的辦法。
2) 96孔板一塊板上可一起操作10個濃度,2個對照樣,8個平行,儀器讀數(shù),成果的準確度相比較試管法大大進步。
3. 抗菌產(chǎn)品的檢測
抗菌產(chǎn)品的檢測一般分定性、定量和現(xiàn)場模仿等三種辦法:
定性辦法:對產(chǎn)品的抗菌功能進行定性的判別,相對較籠統(tǒng),操作簡單。
定量辦法:對產(chǎn)品的抗菌功能進行定量的檢測,給出產(chǎn)品的具體抑/滅菌參數(shù),能較清楚地了解產(chǎn)品的抗菌功能,可表示為產(chǎn)品的滅菌率(%),滅菌活性值(對數(shù)削減值)等。
現(xiàn)場模仿試驗法:模仿產(chǎn)品的實在運用狀況來點評其抗菌的功能。
抗菌產(chǎn)品依據(jù)應用領域的不同大致能夠分紅幾大類:紡織品、高分子塑料產(chǎn)品、日化衛(wèi)生用品和消毒劑和涂料等。針對不同的產(chǎn)品類型世界和國內(nèi)都有不少相應的檢測辦法,如:
3.1 紡織品:AATCC100; AATCC147; AATCC30; JIS L 1902; EN ISO 20645; EN ISO 20743; EN 14119; GB/T 20944.1.2; GB 15979; FZ/T 62015; FZ/T 73023等。
3.2高分子塑料產(chǎn)品、涂料:ISO22196; JIS Z 2801; ISO 846; ASTM G21; QB/T 2591等。
3.3日化衛(wèi)生用品和消毒劑:EN1500;EN1276; EN 1040; GB 15981;GB/T 19877.3;消毒技術(shù)規(guī)范等。
3.4 涂料: USP; EP 5.1.3,做成涂片后也可參照塑料產(chǎn)品的檢測辦法進行點評。
辦法的不同直接導致測驗的成果及鑒定的規(guī)范也將不同。
4.抗菌產(chǎn)品的檢測常見的點評辦法主要有以下2種:
4.1滅菌值(率)
4.2抑菌值(率)
4.3模仿點評法
4.1.1滅菌率為抗菌產(chǎn)品觸摸必定數(shù)量污染菌后,在確定的時刻內(nèi)細菌削減百分比或細菌對數(shù)值削減級別。
在這個試驗中,觸摸時刻確實定是很重要的,不同的觸摸時刻能夠得到不同的試驗成果。
觸摸時刻可依據(jù)產(chǎn)品的用途來確定,例如消毒劑、洗手液,一般觸摸的時刻僅為1-10分鐘;抗菌紡織品,塑料制品建議的觸摸時刻為18-24小時,許多資料無法供給細菌繼續(xù)成長所需求的營養(yǎng)成分,污染菌在觸摸24小時后,細菌會發(fā)生自然衰亡的狀況,所以試驗中觸摸時刻一般不**過24小時。
4.2.1當細菌削減的數(shù)量不是和原始污染菌的濃度進行比較,而是和同原料沒有抗菌處理的對照樣品經(jīng)過同樣觸摸時刻后殘留的細菌數(shù)量進行比較時,反映的是產(chǎn)品的抑菌作用。抑菌值會隨不同的測驗對照品發(fā)生變化,對照品的挑選對正確點評抑菌值有很關(guān)鍵的作用。
4.3.1模仿法
模仿法試驗是模仿產(chǎn)品的實踐運用環(huán)境、辦法、程序,對產(chǎn)品的抗菌作用進行點評。
此辦法較為實踐客觀,特別是對3.1-3.4法不適用的產(chǎn)品所選者運用,例如氣體狀的滅菌產(chǎn)品,選用3.1-3.4的辦法都無法對其進行點評,咱們能夠選用模仿法,人為制造一個污染空間,對產(chǎn)品運用前后的細菌數(shù)量進行檢測,點評產(chǎn)品的滅菌值(率)。
除此之外,對一些洗刷產(chǎn)品咱們也能夠模仿人皮進行測驗,模仿人皮咱們能夠選用人造皮或動物皮代替,模仿咱們的皮膚經(jīng)過這些產(chǎn)品洗刷或消毒的進程,計算產(chǎn)品運用前后細菌削減。
有一些試驗還能夠直接在受試者身上進行,例如EN 1500-1997《化學消毒劑和防腐劑 擦手劑 試驗辦法和要求》即選用的是真人的洗手進程,經(jīng)過對一組12-15人洗手進程中,得到的滅菌率進行數(shù)學統(tǒng)計,較終得到產(chǎn)品的滅菌作用點評。
在咱們國家消毒技術(shù)規(guī)范[2008]消毒劑對手消毒模仿現(xiàn)場試驗章節(jié)里有許多種,模仿法測驗的介紹。企業(yè)能夠依據(jù)自己對產(chǎn)品的需求進行挑選。
結(jié)論
抗菌劑和抗菌產(chǎn)品抗菌功能測驗的辦法具有多樣性,各種辦法各有其優(yōu)缺陷。故在抗菌檢測中須依據(jù)樣品的各種特性來確定相應的檢測辦法,才能使得每個企業(yè)能對自己產(chǎn)品的抗菌/滅菌功能有正確
詞條
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