于水質(zhì)儀來說有一些數(shù)據(jù)不論現(xiàn)場,還是在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行時(shí)都獲取不到的,比如飲用水水質(zhì)微生物的,想要得到它們的數(shù)據(jù),如果依靠水質(zhì)儀是無法得到數(shù)據(jù)的,而且想知道飲用水中具體每一種的微生物類型,就必須使用別的一些相應(yīng)的方法。
飲用水微生物的三個(gè)主要步驟:
(1)回收和濃縮,(2)純化和分離,以及(3)測定和表征。在大多數(shù)情況下水里的微生物濃度很低,因此實(shí)際需要初始化從水中濃縮或濃縮的步驟。因?yàn)椴≡w的許多濃縮和回收程序也能夠在水樣中得到其他成分,因此需要進(jìn)行純化,將不需要的物質(zhì)分離。但此時(shí)的濃縮樣品的體積通常仍然太大,還達(dá)不到分析的標(biāo)準(zhǔn),因此需要額外的濃縮步驟和純化。
微生物的物理化學(xué)性質(zhì)對(duì)于回收也有要影響。比如形狀的大小會(huì)影響回收的物理方法,如過濾沉淀和浮選。微生物的表面性質(zhì),如它們的親水性,滲透性和化學(xué)反應(yīng)性會(huì)影響化學(xué)分離。大多數(shù)微生物在中性pH下是親水的和帶負(fù)電荷的,但是大多數(shù)微生物也有疏水性,并且它們具有疏水和親水結(jié)構(gòu)域。一些微生物具有穩(wěn)定階段或形式。一些細(xì)菌也具有影響物理化學(xué)行為的其他特征,例如外多糖層和附屬物,例如鞭毛和皮毛(fimbrae)。在回收和濃縮微生物的方法中,必須考慮這些多種多樣的物理和化學(xué)性質(zhì)。
飲用水微生物常用的方法:
MF方法
水分析的典型的MF方法是通過使已知體積的水通過孔徑足夠小以消除細(xì)菌細(xì)胞(通常為0.45μm)的無菌膜過濾器來進(jìn)行的。然后將過濾器無菌地轉(zhuǎn)移到瓊脂板的表面或用合適的選擇性培養(yǎng)基飽和的吸收墊。允許在過濾器的表面上發(fā)育,并且可以直接計(jì)數(shù)和檢查。MF方法快速且易于執(zhí)行,需要很少的孵化器空間,并且可以處理非常大量的水。在過去30年中它們已經(jīng)成為用于指示生物的水的微生物檢查的方法。
快速方法
雖然微生物水分析的大多數(shù)人仍然依賴于傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法和MF方法。但獲得結(jié)果所需的時(shí)間比較長,對(duì)于一些特定的微生物我們可以使用一些快速分析法,比如利用定量PCR(QPCR)技術(shù)的方法可以快速指示生物如大腸桿菌,和特定病原體,尤其是在MF分析法相結(jié)合時(shí)是快速有效的手段,但一些沒有活性細(xì)胞時(shí)數(shù)據(jù)會(huì)偏高
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