帶你了解為什么細(xì)胞培養(yǎng)*非HEPES莫屬

時(shí)間：2021-04-16作者：武漢德晟生化科技有限公司瀏覽：40

什么是細(xì)胞培養(yǎng)？
細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆，它通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。因?yàn)樯锂a(chǎn)品都是從細(xì)胞得來(lái)，所以可以說(shuō)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中較**、較基礎(chǔ)的技術(shù)。但說(shuō)到細(xì)胞培養(yǎng)我們就不得不提起HEPES這個(gè)有著兩性離子的緩沖劑了。
HEPES
HEPES（4-羥乙基乙磺酸）CAS號(hào)為：7365-45-9，是一種白色結(jié)晶粉末，溶于水，是一種弱酸，其pH緩沖范圍是6.8-8.2，是生物化工中重要的生化制劑，也是生物學(xué)研究領(lǐng)域中被認(rèn)為是重要的緩沖劑之一。
為什么HEPES會(huì)是細(xì)胞培養(yǎng)的*？
這是由于培養(yǎng)中細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的環(huán)境pH值發(fā)生劇烈變化，因此，為了維持可以穩(wěn)定培養(yǎng)細(xì)胞的環(huán)境，是有必要向其中添加適量的某些生物緩沖液。但是，市場(chǎng)上有如此多的生物緩沖液和替代品可用于細(xì)胞培養(yǎng)，為什么要使用HEPES？通常，大多數(shù)細(xì)胞的較佳培養(yǎng)環(huán)境是pH 7.2-pH 7.4?，HEPES的緩沖范圍恰好在pH 6.8-pH 8.2內(nèi)，這對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)是有利的。與其他緩沖液（例如PBS（鹽緩沖鹽水）和TRIS）相比，HEPES在維持細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值方面具有較高的穩(wěn)定性，這也是HEPES廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)，組織培養(yǎng)，蛋白質(zhì)純化和提取，*沉淀，細(xì)胞裂解，活細(xì)胞成像和其他生物/生化研究的原因。
注意事項(xiàng)：
HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)基中的建議較終工作濃度通常為10mM至25mM。較高的濃度可能會(huì)導(dǎo)致在長(zhǎng)時(shí)間的孵育過(guò)程中對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性。
如何處理和存儲(chǔ)HEPES？
HEPES粉具有耐高溫且熔點(diǎn)高達(dá)200℃的特性，因此不會(huì)因高壓滅菌而降解，也可以使用0.2微米針筒式過(guò)濾器過(guò)濾HEPES緩沖液。如果將HEPES水溶液暴露在環(huán)境光下三小時(shí)，則會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的（H?2?O?2），因此應(yīng)注意，HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線(xiàn)，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
不管再適合的東西，我們都要掌握它的特點(diǎn)和規(guī)律，所以多了解產(chǎn)品的特性，這樣才能讓其發(fā)揮出較大的功效。


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• 詞條

  詞條說(shuō)明

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