PCR實驗室建設(shè) 生物安全實驗室改造施工找承緒

時間：2021-03-31作者：上海承緒建筑裝飾工程有限公司瀏覽：75

PCR實驗室建設(shè) 生物安全實驗室改造施工找承緒
PCR實驗室建設(shè)應(yīng)依據(jù)《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》GB50346-2004、《實驗室生物安全通用要求》GB19489-2004、《微生物（Micro-Organism)和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》WS233-2002、《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》GB50073-2001、《潔凈室施工及驗收規(guī)范》JGJ71-90、《通風(fēng)與空調(diào)工程施工及質(zhì)量驗收規(guī)范》、《建筑安裝工程技術(shù)操作規(guī)程通風(fēng)空調(diào)》、《建筑給水排水及采暖工程施工質(zhì)量驗收規(guī)范》、《民用建筑電所設(shè)計規(guī)范》等規(guī)范中相關(guān)條例規(guī)定：對實驗室場地的建筑特色進(jìn)行實驗室平面布局方案設(shè)計，潔凈實驗室內(nèi)操作對象是危險性的微生物，對人體、動植物或者環(huán)境具有危害性，需采用合理的空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)，保持潔凈實驗室在相對負(fù)壓的環(huán)境中不被破壞及擴散。實驗室凈化無菌室、生物安全實驗室都需保證人的安全、環(huán)境安全、廢棄物安全、樣本安全。設(shè)計方案應(yīng)集**性、高安全性、實用性、經(jīng)濟性于一體。
PCR實驗室設(shè)計規(guī)劃四要素
1 試劑準(zhǔn)備區(qū)
用于試驗試劑的準(zhǔn)備。該區(qū)域為正壓，目的是防止污染物質(zhì)溢入。該區(qū)域內(nèi)部又可分為3個區(qū)域：普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)、PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)和PCR主反應(yīng)液準(zhǔn)備區(qū)。在普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)準(zhǔn)備一些樣品核酸提取時所需的裂解液、提取液等；PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準(zhǔn)備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染，避免反復(fù)冷凍和解凍，試劑存貯溶液應(yīng)該被平均為小的工作體積，儲存在這個房間以備后用：PCR主反應(yīng)液準(zhǔn)備區(qū)將進(jìn)行主反應(yīng)混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作。重要提示：不能將其它房間的材料(包括擴增、模板和目標(biāo)核酸或陽性對照、供應(yīng)品、或設(shè)備)帶進(jìn)試劑準(zhǔn)備區(qū)。
2 樣品準(zhǔn)備區(qū)
該區(qū)域無壓力設(shè)置要求。該區(qū)域是用于對樣品進(jìn)行分樣，將樣品進(jìn)行研磨、粉碎、勻漿的區(qū)域。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產(chǎn)生氣溶膠，因此，存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性。該區(qū)域與后面的區(qū)域應(yīng)嚴(yán)格隔離，應(yīng)放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中。在樣品準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)還可設(shè)立一個**的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存，應(yīng)該和樣品準(zhǔn)備區(qū)其它區(qū)域隔離開。樣品準(zhǔn)備區(qū)域的人員不得進(jìn)入試劑準(zhǔn)備區(qū)。
3 核酸提取區(qū)
核酸提取區(qū)是進(jìn)行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域為負(fù)壓，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準(zhǔn)備區(qū)又包括從樣品中進(jìn)行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應(yīng)混合液管中的操作區(qū)域。添加完樣品后，PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時，陽性對照和含目標(biāo)序列的樣品要與待測樣本分開操作，以避免模板添加時造成交叉污染,重要提示：這個房間里的一切物品不得帶人試劑準(zhǔn)備區(qū)。
4 擴增和產(chǎn)品檢測區(qū)
該區(qū)域是用來進(jìn)行PCR擴增和PCR分析的。PER儀放置在這個區(qū)域。房間保持負(fù)壓，目的是防止核酸溢出。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套，在離開房間前脫去，防止擴增子污染其它地點。所有用于擴增和產(chǎn)品檢測的設(shè)備要*用于這個房間。PCR分析]二作也設(shè)置在該區(qū)域，例如：酶切、測序、克隆等，但實驗室應(yīng)盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間。以降低擴增產(chǎn)物的污染風(fēng)險。如果沒有條件在該區(qū)域設(shè)立負(fù)壓，此區(qū)域必須建立排風(fēng)裝置。
重要提示：這個房間的物品不能帶人樣品準(zhǔn)備區(qū)或試劑準(zhǔn)備區(qū)。
PCR實驗室凈化工程（PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)），是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，也是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的實驗技術(shù)。其特點是能將微量的DNA大幅增加，實驗室通常分為四個區(qū)域，即：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)（如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并）。進(jìn)入各個區(qū)域嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開時，不得將工作服帶出。 試劑儲存和準(zhǔn)備室（標(biāo)本制備區(qū)），儀器主要配置有：冷凍離心機、生物安全柜、冰箱、可移動紫外燈、全自動力核酸蛋白純化儀、**工作服和工作鞋等。擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)配置有：冰箱、高速離心機、**凈工作臺、PCR儀（要求負(fù)壓狀態(tài)）、可移動紫外燈、微量加樣器、核酸擴增儀等。擴增產(chǎn)物分析區(qū)主要配置有：移液器、振蕩器、**凈工作臺、毛細(xì)管電泳儀、冰箱、離心機、微量加樣器、可移動紫外燈等。
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