實(shí)驗(yàn)名稱:聲化學(xué)誘導(dǎo)艾氏腹水瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制初探
研究方向:生物醫(yī)學(xué)
測(cè)試目的:
聲動(dòng)力學(xué)療法(Sonodynamictherapy,SDT)是利用超聲(Ultrasound,Us)具有深部穿透及準(zhǔn)確聚焦于生物組織局部的能力,相對(duì)并且能在**細(xì)胞中特異性富集的聲敏劑分子血卟啉衍生物,產(chǎn)生具有高氧化活性的單線態(tài)氧等自由基,能有效地殺**細(xì)胞從而的新方法。
學(xué)者主要提出超聲空化效應(yīng)、單線態(tài)氧理論、自由基理論等,但聲動(dòng)力學(xué)療法對(duì)**細(xì)胞作用的生物學(xué)機(jī)制仍不清楚。在超聲激卟啉殺傷癌細(xì)胞的研究中,通過(guò)掃描電鏡、透射電鏡以及PI-HO和AnnexinV-PI熒光雙染,觀察受損后細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,曾發(fā)現(xiàn)處理后的S180和艾氏腹水**細(xì)胞(EAT)有核物質(zhì)凝集、趨邊排列以及凋亡小體的形成等細(xì)胞凋亡特征,提示聲動(dòng)力學(xué)療法不僅能直接殺傷**細(xì)胞,還可通過(guò)誘導(dǎo)**細(xì)胞凋亡來(lái)**。前期聲動(dòng)力學(xué)療法的形態(tài)學(xué)研究發(fā)現(xiàn),線粒體是較為敏感易變的細(xì)胞器之一,它不僅是細(xì)胞的能量代謝中心,氧自由基的重要產(chǎn)生部位,而且與脊椎動(dòng)物細(xì)胞凋亡的調(diào)控密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用頻率為1.43MHz,聲強(qiáng)為3.0W/cm2的高頻聚焦超聲和濃度為0.025mg/ml的血卟啉處理艾氏腹水**細(xì)胞,通過(guò)檢測(cè)3種促凋亡蛋白的表達(dá)、**氧化物歧化酶的活性以及膜脂質(zhì)過(guò)氧化物的含量,研究超聲激卟啉誘導(dǎo)艾氏腹水瘤細(xì)胞的凋亡機(jī)制及其與氧自由基的關(guān)系。
測(cè)試設(shè)備:ATA-M110高頻功率放大器模塊、昆明系小白鼠、艾氏腹水**細(xì)胞系、超聲探頭、血卟啉衍生物為單羥乙基單次卟啉、細(xì)胞色素c和Bax單抗體、caspase-3單抗體、鏈霉卵白素SP試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
接種艾氏腹水**細(xì)胞于10只小鼠腹腔1周后,隨機(jī)取5只小鼠(其余5只備用),抽取腹水細(xì)胞,分別置于醫(yī)用薄壁試管(含RPMI1640+10%小牛培養(yǎng)基),于37℃CO2孵箱培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)時(shí)用生理鹽水調(diào)整細(xì)胞濃度至3×106cells/ml。每只小鼠抽取的腹水細(xì)胞再分為4管,每管0.5ml細(xì)胞懸液,分別設(shè)為對(duì)照組(CT)、血卟啉組(H)、超聲組(Us)和超聲加血卟啉組(UH)。H組和UH組每管中加入血卟啉5μl,使其終濃度為0.025mg/ml,37℃CO2培養(yǎng)箱孵育45min,Us組和UH組分別在頻率為1.43MHz,強(qiáng)度為3.0W/cm2的超聲裝置中聲照處理3min。各實(shí)驗(yàn)組分別于不同時(shí)間段取材處理。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,以確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
*細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)Bax,細(xì)胞色素c,caspase-3蛋白表達(dá)各實(shí)驗(yàn)組分別于超聲處理后0h,1h,3h取材。常規(guī)細(xì)胞涂片,固定10min,PBS洗滌3次,每次5min;含0.3%TritonX-100的PBS處理10min,以增加膜通透性,PBS洗滌3次,每次5min;0.3%H2O2-甲醇于37℃處理15min,封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,PBS洗滌3次,每次5min;正常山羊于37℃封閉30min,封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn);分別滴加抗Bax、細(xì)胞色素c和caspase-3單抗體(1∶100,1∶50,1∶500),4℃孵育過(guò)夜,陰性對(duì)照組以0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)取代一抗;加入的二抗為生物素標(biāo)記羊抗兔IgG或生物素標(biāo)記羊抗小鼠IgG,室溫孵育1h,PBS洗滌3次,每次5min;滴加辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液,室溫孵育1h,PBS洗滌3次,每次5min;DAB顯色,梯度酒精脫水,中性樹膠封固蓋片。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
根據(jù)*細(xì)胞化學(xué)光鏡觀察結(jié)果和兩因素重復(fù)測(cè)量方差分析可見,不同處理方法對(duì)Bax,細(xì)胞色素c和caspase-3蛋白有較顯著影響,不同取材時(shí)間對(duì)這三種凋亡蛋白亦有較顯著影響。TukeyHSB法多重比較顯示:0h時(shí)各實(shí)驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);處理1h時(shí),UH組的3種促凋亡蛋白表達(dá)均**其它3個(gè)處理組(U,H和CT組),差異較顯著(P>
EAT細(xì)胞中SOD活力和水平測(cè)定結(jié)果,超聲+血卟啉處理EAT細(xì)胞后1h取材,發(fā)現(xiàn)與CT和H組相比,U組的SOD活力略有降低,但不顯著(P>0.05),細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化水平無(wú)顯著變化(P>0.05),UH組的SOD活力顯著降低,細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化水平顯著升高。(P>
表1:TukeyHSB法對(duì)不同取材時(shí)間Bax、細(xì)胞色素c和caspase-3平均光密度值(×10-4)的多重比較
圖1:不同時(shí)間段取材各組Bax蛋白平均光密度值變化
圖2:不同時(shí)間段取材各組細(xì)胞色素c蛋白平均光密度值變化
安泰ATA-M110高頻功率放大器模塊:
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詞條
詞條說(shuō)明
Aigtek聲功率放大器的選型技巧及參數(shù)指標(biāo)有哪些
聲功率放大器是一種廣泛應(yīng)用于聲學(xué)測(cè)量、醫(yī)療成像、聲納等領(lǐng)域的裝置,其作用是將輸入信號(hào)的功率放大到需要的水平。在選型聲功率放大器時(shí),需要考慮一些關(guān)鍵的技巧和參數(shù)指標(biāo),以確保選擇合適的設(shè)備來(lái)滿足特定的需求。,需要考慮的是功率放大器的頻率范圍。聲波在不同應(yīng)用領(lǐng)域中的頻率范圍不同,因此需要選擇能夠支持所需頻率范圍的功率放大器。常見的聲頻率范圍包括幾十kHz,根據(jù)具體應(yīng)用需求確定頻率范圍是選型的要考慮因素。
Aigtek功率放大器在換能器超聲**場(chǎng)強(qiáng)測(cè)試中的應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)名稱:功率放大器在換能器超聲**場(chǎng)強(qiáng)測(cè)試中的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸O(shè)計(jì)并制作了一種用于強(qiáng)酸性輸液系統(tǒng)除垢的超聲波換能器。利用聚丙烯管道組裝的靜態(tài)流體超聲場(chǎng)強(qiáng)測(cè)試系統(tǒng)研究了影響超聲傳播的因素。實(shí)驗(yàn)設(shè)備:超聲探測(cè)器,超聲振頭系統(tǒng),ATA-4011功率放大器,函數(shù)信號(hào)發(fā)生器,數(shù)字示波器等。實(shí)驗(yàn)過(guò)程:超聲換能器制作:按照將陶瓷超聲**頭、防酸墊圈、塑料支撐板﹑導(dǎo)波棒、壓電振子﹑紫銅電極片及鋼質(zhì)負(fù)載用螺釘固定。
高電壓放大器在超聲波無(wú)損檢測(cè)技術(shù)中的應(yīng)用
超聲檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)對(duì)象范圍廣;檢測(cè)深度大;定位準(zhǔn)確,靈敏度高;成本低,使用方便;速度快;對(duì)人體無(wú)害,便于現(xiàn)場(chǎng)使用等特點(diǎn),已成為無(wú)損檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用較為廣泛的一種。特別是在結(jié)構(gòu)和材料的無(wú)損檢測(cè)領(lǐng)域,超聲檢測(cè)技術(shù)幾乎涵蓋所有的相關(guān)領(lǐng)域。在常規(guī)超聲波檢測(cè)過(guò)程中,需在待檢測(cè)試件表面涂抹水或油等液體作為耦合劑,干耦合Lamb波檢測(cè)硬件系統(tǒng)主要由干耦合探頭、任意信號(hào)發(fā)生器、功率放大器、多通道示波器、計(jì)算機(jī)及相應(yīng)檢測(cè)
高壓功率放大器在超聲駐波聲場(chǎng)的聽聲器中的應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)名稱:高壓功率放大器在超聲駐波聲場(chǎng)的聽聲器聲壓測(cè)量中的應(yīng)用研究方向:3D打印測(cè)試目的:利用聽聲器對(duì)聲場(chǎng)的測(cè)量是一種基于對(duì)聲壓的采集,利用CPB分析及FFT分析處理,得到涉入點(diǎn)聲壓的方法。介于聽聲器采集信號(hào)為時(shí)域信號(hào),而對(duì)于信號(hào)的分析,雖時(shí)域信號(hào)可直觀觀測(cè)信號(hào)形狀,但這一特性需基于較短時(shí)間觀測(cè),且不能利用有限參數(shù)對(duì)信號(hào)進(jìn)行描述,成分析困難,采樣周期再密集也無(wú)法一的還原出原始信號(hào)。而對(duì)于頻域信號(hào)
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