實(shí)驗(yàn)名稱:電壓放大器在液滴微流控芯片的功能研究中的應(yīng)用
研究方向:微流控生物芯片
測試目的:
液滴微流控技術(shù)能夠在微通道內(nèi)實(shí)現(xiàn)液滴生成,精準(zhǔn)控制生成液滴的尺寸以及生成頻率。結(jié)合芯片結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)和外部控制條件,可以對液滴進(jìn)行多樣化的操控,以滿足不同研究和應(yīng)用場景需求。在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,液滴具有廣泛的應(yīng)用**,可以視為一個(gè)獨(dú)立的微反應(yīng)器,具有微納尺度體積,容易高通量操作,非常適用于大樣本下的生化檢測和分析。
本文使用液滴微流控技術(shù)作為操控反應(yīng)液體組分,構(gòu)建功能微結(jié)構(gòu)的一種方法。通過微流控芯片操作平臺、控制方法設(shè)計(jì),分別研究了可用作藥物載體的聚乙烯醇微球和用于生物傳感分析的4-氰基-4'-戊基聯(lián)苯(4-Cyano-4'-n-pentylbiphenyl,5CB)液晶液滴傳感陣列的制備。針對不同材料特性和應(yīng)用需求,探索、優(yōu)化了液滴(陣列)操作方法。在此基礎(chǔ)上,開展了相關(guān)應(yīng)用研究,如實(shí)驗(yàn)分析了液晶液滴陣列在不同控制條件下的檢測能力。
測試設(shè)備:ATA-2042電壓放大器、信號發(fā)生器、芯片、驅(qū)動泵、偏光顯微鏡、相機(jī)等。
實(shí)驗(yàn)過程:
首先使用液滴制備芯片制備液晶液滴,再通過流動運(yùn)送的方式將液滴輸送并捕獲固定到液晶液滴捕獲芯片的陣列結(jié)構(gòu)中,然后基于此液晶液滴陣列結(jié)構(gòu)芯片開展電調(diào)控研究。
圖:試驗(yàn)系統(tǒng)(a)聚焦流芯片;(b)液晶液滴陣列電調(diào)控芯片;(c)搭建完成的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(d)通道中的陣列結(jié)構(gòu)
液晶液滴制備芯片由PDMS結(jié)構(gòu)層與潔凈玻片的鍵合后完成,如上圖(a)所示。對于陣列固定芯片,PDMS芯片結(jié)構(gòu)和ITO電極加工完成后,需要將兩部分鍵合成完整的芯片。將兩者等離子清洗處理3min,根據(jù)標(biāo)記位點(diǎn)進(jìn)行結(jié)構(gòu)的對準(zhǔn),PDMS的陣列固定結(jié)構(gòu)區(qū)域需完全位于基底ITO玻璃上的兩電極之間(如上圖(d))。由于ITO電極的玻璃基底上存在ITO層,對鍵合的牢固程度造成了一定的影響,在鍵合完成后將芯片置于熱板上加熱并使用重物重壓1~2h,以增加鍵合的牢固程度。鍵合之后的芯片在導(dǎo)管孔插入導(dǎo)管并用PDMS混合膠體封合,在電極的導(dǎo)電膠帶粘合點(diǎn)貼上導(dǎo)電膠帶,芯片實(shí)物圖如上圖(b)所示。驅(qū)動泵上固定的器通過針頭連接到芯片的導(dǎo)管上,芯片置于顯微鏡的觀察視野下;信號發(fā)生器的輸出端口通過導(dǎo)線連接到電壓放大器的輸入端口,的輸出端口通過導(dǎo)線夾子夾到貼在芯片電極上的導(dǎo)電膠帶上,使用膠帶將導(dǎo)線夾子和芯片固定在載物臺上,防止實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)生移動而干擾實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察和記錄;最后將相機(jī)接到顯微鏡上的外接接口。搭建完成后的系統(tǒng)如上圖(c)所示。
液晶液滴制備芯片的親水改性處理,生成的液滴結(jié)果如下圖(a)和下圖(b)所示。液晶液滴的固定是負(fù)向壓力驅(qū)動的,將驅(qū)動泵的模式設(shè)置為抽取進(jìn)樣,流量設(shè)置為200μL/h。液滴被固定并填充整個(gè)捕獲陣列后(下圖(c)),用移液將加樣槽中剩余的液晶液滴吸取并移除,過程中需用SDS溶液沖洗3~5次。多余的液滴移除后降低進(jìn)樣流量為3μL/h,輸入PBS緩沖液,持續(xù)低流量抽取10min,穩(wěn)定捕獲腔室中的液晶液滴的構(gòu)像狀態(tài)(下圖(d))。
圖:液晶液滴制備
陣列中液晶液滴構(gòu)像穩(wěn)定后,給芯片電極施加電信號。信號發(fā)生器的輸出波形為正弦波,電壓放大器的放大倍數(shù)設(shè)置為50倍,調(diào)節(jié)信號發(fā)生器的幅值和頻率,電信號的幅值從1~觀察并記錄液滴的構(gòu)像變化情況。探究液晶液滴構(gòu)像與電信號參數(shù)之間的關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
圖:(液晶液滴狀態(tài))當(dāng)沒有施加電場的情況下,液晶液滴呈中心徑向?qū)ΨQ(a),偏光顯微鏡下的構(gòu)象是十字結(jié)構(gòu)(c);當(dāng)電場強(qiáng)度為0.25V/μm時(shí)(50KHz),液晶液滴呈軸對稱,缺陷沿對稱軸發(fā)生偏移(b),偏光顯微鏡下圖像(d)
液晶液滴在電場的作用下會發(fā)生構(gòu)像轉(zhuǎn)變。液晶液滴被捕獲后,降低進(jìn)樣流速,液晶液滴受流速的影響減弱,在錨定能的作用下回復(fù)到中心缺陷的十字構(gòu)象。打開信號發(fā)生器和電壓放大器,沿流動的主通道方向在通道內(nèi)形成電場。在初始電場E=0時(shí),表面活性劑SDS在液晶液滴表面吸附并形成一定的錨定能,此時(shí)液晶分子在液滴內(nèi)呈放射狀排列(示意圖如上圖(a)所示),缺陷位于幾何中心點(diǎn)位置,偏振光下液晶呈十字構(gòu)象(上圖(c))。
當(dāng)施加電場后,液晶液滴的自由能由表面錨定能、彈性自由能和電場能三部分構(gòu)成。當(dāng)電壓幅值過低時(shí),電場能的作用不足以影響由表面錨定能和彈性自由能占主導(dǎo)的液晶液滴的自由能,液滴會維持之前的未加電的狀態(tài),即構(gòu)象基本不發(fā)生變化。隨著電壓幅值的增大,電場作用開始發(fā)揮作用,影響液晶液滴的自由能,但仍要克服表面錨定能和彈性自由能的作用,因此會發(fā)生中心缺陷的偏移。上圖(b)為當(dāng)信號發(fā)生器電壓幅值為9Vp~p時(shí),通道內(nèi)電場強(qiáng)度為0.25V/μm(計(jì)算:電壓幅值9×50倍電壓放大倍數(shù),除以電極間距1800μm),此時(shí)液滴的缺陷偏移中心,并向構(gòu)象對稱軸的一端靠近,成逃逸徑向配置,液晶液滴的偏光顯微圖片如上圖(d)所示。
ITO電極與通道內(nèi)的溶液接觸,在低頻的條件下容易發(fā)生電解,本文的研究中使用的電信號頻率選擇大于等于1KHz。電壓幅值為5Vp~p,通電時(shí)間20s。電信號頻率分別設(shè)置為1KHz、10KHz、50KHz、100KHz、500KHz、1MHz,不同的頻率下,液晶液滴的響應(yīng)不同,液晶液滴的取向偏移隨著頻率的增大而增加(下圖(a~f)),偏移距離與電壓幅值的對應(yīng)關(guān)系如下圖(g)所示。
圖:(a~f)不同頻率下,液晶液滴的變化情況。圖中標(biāo)尺為50μm。(g)缺陷偏離圓心的距離與液滴半徑比值的百分占比隨電壓頻率的變化
根據(jù)德拜方程,電場的頻率會間接影響液晶液滴分子在電場中的介電常數(shù)分量,介電常數(shù)的變化主要反映了液晶內(nèi)部指向矢的取向順序變化以及對稱性的變化。頻率的變化較終體現(xiàn)在電場作用下液晶液滴內(nèi)部缺陷的偏移。另外,根據(jù)漏電介質(zhì)模型(描述液滴在不相溶介質(zhì)中受電場作用時(shí)行為的模型),液滴和介質(zhì)的交界面上存在有限的電荷密度,在外加電場的作用下,這些表面電荷與外加電場的相互作用產(chǎn)生了電動效應(yīng),較終導(dǎo)致與液滴表面平行的流體運(yùn)動。液滴和不相溶溶液這兩種介質(zhì)的電導(dǎo)率、粘度和介電常數(shù)是不同的,造成液滴上下的流動方向或是向外或向內(nèi),存在方向上的差異。頻率的大小影響液晶分子發(fā)生偏轉(zhuǎn)的度,從而引起了液晶液滴的偏轉(zhuǎn)。
安泰ATA-2042高壓放大器:
圖:ATA-2042高壓放大器指標(biāo)參數(shù)
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本文實(shí)驗(yàn)案例參考自知網(wǎng)論文《基于液滴微流控芯片的功能微結(jié)構(gòu)制備和應(yīng)用研究》
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