定海水質(zhì)細(xì)菌檢測、大腸菌群檢測

     目的比較多管發(fā)酵法(包括乳糖蛋白胨和EC―MUG培養(yǎng)基)與酶底物法(MMO―MUG培養(yǎng)基)測定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,為日常水質(zhì)檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌選用一種佳檢測方法。方法依照《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》GB中的多管發(fā)酵法與酶底物法測定水中大腸菌群和大腸埃希氏菌,進(jìn)行方法的適用性試驗、靈敏度試驗、水樣加標(biāo)試驗及實際水樣品檢測應(yīng)用。

     

        結(jié)果適用性試驗結(jié)果為多管發(fā)酵法與酶底物法檢測結(jié)果顯示有某些菌株的差別;靈敏度試驗酶底物法約為1cfu100mL,多管發(fā)酵法約為1cfu100m;加標(biāo)試驗結(jié)果三種培養(yǎng)基法無明顯差別;水樣品檢測兩種方法的結(jié)果差別無顯著性。結(jié)論多管發(fā)酵法與酶底物法檢測水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的結(jié)果差別無顯著性,但酶底物法只需一種培養(yǎng)基在24h內(nèi)同時檢出大腸菌群和大腸埃希氏菌結(jié)果,操作較為方便、時間可節(jié)約24h-48h、結(jié)果觀察直觀容易。jsgfjc8788199

     

        生活飲用水一般不檢測大腸埃希氏菌、腸球菌的,也并沒有選擇五種指示菌(根本沒這說法),基本上都是以一類菌作為一個項目.

    其實生活飲用水的檢測項目有很多,但是如果沒有特殊要求,一般只做三項:細(xì)菌菌落總數(shù)、大腸菌群、耐熱大腸菌群,這些項目綜合體現(xiàn)了生活飲用水的水質(zhì)和污染情況.

     

        如果你一定要問那兩個項目的意義,其實大腸埃希氏菌、腸球菌和耐熱大腸菌群的意義是基本一致的,都是體現(xiàn)水質(zhì)受糞便污染的情況.其實耐熱大腸菌群就是因為適合我國國情、檢測成本低廉、方便直觀,這樣才以這個項目來代替大腸埃希氏菌的.

     

        固定底物技術(shù)酶底物法(Defined Substrate Technology)采用大腸菌群細(xì)菌能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色,以及大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來判斷水樣中是否含有大腸菌群及大腸埃希氏菌。固定底物技術(shù)酶底物法可以選用標(biāo)準(zhǔn)中推薦粉狀培養(yǎng)基(IDEXX公司的Coiliert試劑)來進(jìn)行簡便的操作;*確認(rèn)試驗;固定底物技術(shù)酶底物法檢測時間短,只需24小時即可同時定量出水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌的MPN值。

     

         操作步驟:

    1) 將一個Colilert試劑倒入裝有100ml水樣的無菌取樣瓶或無菌玻璃瓶中,混勻。(如圖1)

    2) 將瓶內(nèi)的水樣全部倒入51孔或者是97孔定量盤中,以手撫平定量盤背面以趕除孔穴內(nèi)氣泡,然后使用定量程控封口機進(jìn)行封口。

    3) 將定量盤放在36±1℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24小時

    注:如檢測耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)則需放在44.5℃,培養(yǎng)24小時;如果培養(yǎng)時間**過28小時,則陰性結(jié)果則結(jié)果有效,如果為陽性結(jié)果則結(jié)果無效,需重做此水樣。

    4) 根據(jù)下面的結(jié)果解釋讀取結(jié)果。數(shù)出陽性格子數(shù)后對照MPN表得到結(jié)果。blob


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