什么是離心機?離心機選購指南?

    I 離心機的相關(guān)知識介紹 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。

    ● ? ? 相對離心力(RCF)

    又稱為(g)力是在離心過程中實際施加在樣品上的作用力。

    RCF=1.18x離心半徑(mm)x(轉(zhuǎn)速/1000)2

    ? 在離心過程中能夠直接設(shè)定離心力離心,可以使結(jié)果較加準確、可靠,較具有科學(xué)性。

    ● ? ? 轉(zhuǎn)速(rpm)

    通常以每分鐘多少轉(zhuǎn)來表示。相對離心力與轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速的平方成正比。因此,轉(zhuǎn)速是決定離心力的主要因素。

    ● ? ? 離心半徑

    指轉(zhuǎn)子中軸到樣品管中心的距離,離心半徑與離心力成正比。不同的轉(zhuǎn)子具有不同的離心半徑。不同廠家相同容量的離心機轉(zhuǎn)子半徑不同,相同的轉(zhuǎn)速所得到的離心力也不同,

    對RCF會產(chǎn)生很大影響。

    綜上所述:轉(zhuǎn)速、離心半徑均對離心力產(chǎn)生較大影響,在實際使用過程中,能夠直接設(shè)定離心力,就可以把影響降到小。

    II 離心效果 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    ● ? ? 離心積分

    相對離心力和離心時間是決定離心效果的關(guān)鍵因素。但無法僅用這兩個參數(shù)來準確衡量離心效果。**上公認使用離心積分(HRF)來衡量離心效果。

    ? ? ?離心積分是指離心過程中離心力對離心時間的積分。離心積分考慮了離心過程中各種影響因素對離心加速的影響,保證施加于樣品的離心力總量一致,從而保證一致的離心效果。離心積分還表明:短時間的高速離心和長時間的低速離心可以獲得相同的離心效果。

    ● 差速離心(differential centrifugation )

    ? ? ?差速離心法是利用樣品中各種組分的沉降系數(shù)不同而進行分離的方法,又稱差分離心或差級離心。通常兩個組分的沉降系數(shù)差在10倍以上時可以用此法分離。在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、最后為核蛋白體。沉降系數(shù)差別在一個或幾個數(shù)量級的顆粒,可以用此法分離

    ? 差速離心首先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時間,應(yīng)用方式與學(xué)科:

    ? 1:分步改變離心速度,用不同強度的離心力使具有不同密度的物質(zhì)分批分離的方法。

    應(yīng)用學(xué)科:生物化學(xué)與分子生物學(xué)(一級學(xué)科);方法與技術(shù)(二級學(xué)科)

    2:利用不同物質(zhì)沉降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術(shù)。常用于分離細胞勻漿中的各種細胞器。

    應(yīng)用學(xué)科:細胞生物學(xué)(一級學(xué)科);細胞生物學(xué)技術(shù)(二級學(xué)科)

    差速離心法的優(yōu)點是樣品的處理量較大,用于大量樣品的初分離,可使用容量較大的轉(zhuǎn)子

    III ?安全離心 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    ?操作者的安全防護

    ? ? ?樣品與轉(zhuǎn)子在高速離心狀態(tài)下會產(chǎn)生巨大的離心力,因此對使用者的安全保護是離心機設(shè)計的首要因素。

    ● ? ? 需用高強度材料

    【1】 ? ? ? 環(huán)氧涂層鋼制材料:抵抗各種溶劑和碎片的侵蝕。

    【2】 ? ? ? 鋼制結(jié)構(gòu),不銹鋼腔:高強度,抗腐蝕

    【3】 ? ? ? 盔甲電鍍:當轉(zhuǎn)子或吊桶碎裂是,能夠起到保護腔體作用

    ● ? ? 不平衡保護,不平衡時自動停機,自動失衡識別。

    ● ? ? 轉(zhuǎn)子自動識別【高速離心機】,**速保護。防止使用者誤操作導(dǎo)致危險的發(fā)生

    ● ? ? 自動平衡,*配平

    ● ? ? 保證轉(zhuǎn)子高速運轉(zhuǎn)時突然發(fā)生軸斷裂時:

    【1】 ? ? ? 轉(zhuǎn)子不會飛出

    【2】 ? ? ? 離心力外表看不成變形

    【3】 ? ? ? 斷電后能正常開蓋

    【4】 ? ? ? 內(nèi)腔體變形不**過:3mm

    【5】 ? ? ? 離心機在試驗臺上不發(fā)生水平位移

    ● ? ? 使用者需與離心機保持至少30cm的安全距離

    ● ? ? 溫度控制,保證生物樣品活性

    離心常見的溫度設(shè)定為:4℃,20, ?37℃ ,其中以4℃(生物零度)較為重要,這就要求離心機具備預(yù)制冷功能、定溫啟動功能,保證樣品一放入就處于安全溫度下離心。

    Ⅳ ?舒適離心 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

    ? 低噪音設(shè)計:

    通常離心機噪音范圍為55—70dBA;

    65dBA為可接受的噪音水平

    <60dBA為較好的噪音水平

    每增加3dBA相當于增加一倍的噪音效果

    制備性離心機可分為三類:

     ?、牌胀x心機:轉(zhuǎn)速6000rpm左右,相對離心力近6000×g,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能嚴格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),于室溫下操作,用于收集易沉降的大顆粒物質(zhì),如紅血球、酵母細胞等。這種離心機多用交流整流子電動機驅(qū)動,電機的碳刷易磨損,轉(zhuǎn)速是用電壓調(diào)壓器調(diào)節(jié),起動電流大,速度升降不均勻,一般轉(zhuǎn)頭是置于一個硬質(zhì)鋼軸上,因此平衡離心管及內(nèi)容物就較為重要,否則會損壞離心機。

     ?、聘咚倮鋬鲭x心機:轉(zhuǎn)速為20000~25000rpm(r/min),相對離心力為89000×g,容量可達3升,分離形式也是固液沉降分離,轉(zhuǎn)頭配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭和大容量連續(xù)流動式轉(zhuǎn)頭、一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0~40C,轉(zhuǎn)速、溫度和時間都可以嚴格準確地控制,并有指針或數(shù)字顯示,通常用于微生物菌體、細胞碎片、大細胞器、硫銨沉淀和*沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細胞器如核蛋白體或單個分子。

     ?、?*速離心機:轉(zhuǎn)速可達50000~80000rpm,相對離心力可達510000×g,生產(chǎn)廠商有美國的貝克曼公司和日本的日立公司等,離心容量由幾十毫升至2升,分離的形式是差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,離心管平衡允許的誤差要小于0.1克。**速離心機的出現(xiàn),使生物科學(xué)的研究領(lǐng)域有了新的擴展,它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細胞器得到分級分離,還可以分離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。



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