血細胞計數(shù)原理

時間：2024-12-27作者：杭州川一實驗儀器有限公司瀏覽：99

細胞培養(yǎng)技術(shù)中，細胞計數(shù)是一項基本功，對于標準化培養(yǎng)條件以及需要定量的實驗來說都關(guān)鍵。這里介紹使用血細胞計數(shù)器對細胞進行計數(shù)的經(jīng)典方法以及中間一些需要注意的細節(jié)。
制備細胞懸液：
對于貼壁生長的細胞，我們需要使用胰酶消化的方法使細胞從培養(yǎng)皿表面脫落
根據(jù)需要加入合適體積的培養(yǎng)基，將細胞進行中和及稀釋，以得到均質(zhì)的細胞懸液。要求盡可能將細胞吹打散開，不要殘留任何細胞團
準備血細胞計數(shù)器：
使用70%乙醇將蓋玻片和血細胞計數(shù)器清潔干凈
將將蓋玻片潤濕（使用水或呼一口氣，目的是使蓋玻片與血細胞計數(shù)器接觸較緊密，易于粘連），并覆蓋至血細胞計數(shù)器上
臺盼蘭染色（可選）：
如果需要計算細胞的活力，則需要將細胞懸液和0.4%臺盼蘭等體積混合
室溫孵育3-5分鐘，使臺盼蘭進入死細胞，使死細胞著藍色
血細胞計數(shù)器加樣：
使用吸管將細胞懸液或細胞/臺盼蘭混合液滴加到血細胞計數(shù)器計數(shù)池的邊緣。此時液滴將在虹吸的作用下進入蓋玻片下方的計數(shù)池
以同樣的方式在另一側(cè)的計數(shù)池中也加入細胞懸液
將計數(shù)板放置幾分鐘使細胞擴散，同時用吸水紙吸除多余的液體
細胞計數(shù)：
在100倍顯微鏡下，移動計數(shù)板將視野對準計數(shù)板的*大方塊，該方塊四周有一圈3條平行線包圍，中間有密集的網(wǎng)格。*方塊區(qū)差不多剛好可以填滿整個視野
使用手持式計數(shù)器記錄計數(shù)池四個以及*方塊內(nèi)的細胞數(shù)（1-5號位置，經(jīng)典的current-protocol推薦每個方塊細胞數(shù)應不大于20-50），并重復記錄另一側(cè)計數(shù)池中的細胞數(shù)，總計十個方塊。計數(shù)的方法是只計算上邊和左邊壓線的細胞，而右邊和下邊壓線的細胞不予計算（下圖，總體原則是“計上不計下，計左不計右”，判斷標準為是否接觸三條邊線的中間線）。如果有多個細胞沒有吹散成團存在，此時只可記為一個細胞。如果團塊很多，則可能需要重新吹打甚至消化直至絕大多數(shù)細胞為單個細胞
杭州川一實驗儀器有限公司專注于全自動氮吹儀,一體化蒸餾儀,光化學反應儀,氮氣發(fā)生器,分子蒸餾儀等, 歡迎致電 17366658694

• 詞條

  詞條說明

• 生化培養(yǎng)箱驗證方案

  1．設備概述：用于需氣菌、厭氣菌的培養(yǎng)、保存。 溫度控制采用集成電路附有LED數(shù)字顯示，溫度調(diào)整方便，并設有限溫保護。箱內(nèi)氣流循環(huán)采用進口軸流風扇強迫對流，使箱內(nèi)溫度達到均勻。 2．驗證目的 2．1通過對生化培養(yǎng)箱的空載熱分布，確認培養(yǎng)箱內(nèi)熱分布差值符合要求。 2．2通過滿載熱分布，由箱體內(nèi)部達到培養(yǎng)要求需要設定的溫度及滯后時間，來確認此培養(yǎng)箱培養(yǎng)溫度誤差在規(guī)定的范圍內(nèi)對需氣菌、厭氣菌的培養(yǎng)無影響

• 操作水浴恒溫振蕩器的使用說明

  水浴恒溫振蕩器是一種培養(yǎng)，制備生物樣品的生化儀器，是植物、生物、微生物、遺傳病毒、醫(yī)學、環(huán)保等科研、教育和生產(chǎn)部門作精密培養(yǎng)制備不可缺少的實驗室設備。水浴恒溫振蕩器的使用說明：1.在轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)中速使用，可延長水浴恒溫搖床的使用壽命。2.水浴恒溫搖床應放置在較牢固的工作臺上，環(huán)境應保持清潔整齊，通風干燥，給排水方便。3.使用水浴恒溫搖床前，先將調(diào)速旋鈕置于關(guān)“振蕩開關(guān)”。4.裝培養(yǎng)試瓶應注意以下幾點

• 按步驟介紹如何添加氮氣發(fā)生器的電解液

  氮氣發(fā)生器是根據(jù)電催化法進行空氣分離的原理制成，其中電解池是利用燃料電池的逆過程設計而成。作為壓力穩(wěn)定且純凈的原料空氣進入到電解池中，空氣中的氧在陰極被吸附而獲得電子，與水作用生成氫氧根離子，并遷移到陽極，zui后在陽極處失去電子析出氧氣，因此空氣中的氧不斷被分離。只留下氮氣隨氣路輸出。其中電解液主要采用的是“強制循環(huán)方式”，由電磁泵帶動電解液在液路中循環(huán)，提高了電解效率，保證氮氣的產(chǎn)生量。我們下

• 一體化蒸餾儀裝置的順序

  揮發(fā)蒸餾儀裝置的順序為：由下往上，從左向右的順序。并保證蒸餾裝置中的部分離水池較近，即靠近水池。整個裝置儀器的軸線應在一個平面上，且此平面應魚試驗臺桌邊平行。在安裝揮發(fā)蒸餾儀裝置前，對安裝的臺面，電源，安裝空間進行檢查，確保臺面牢固，電壓穩(wěn)定，空間滿足。揮發(fā)蒸餾儀裝置安裝詳細步驟：1.安裝橫梁，玻璃器皿，根據(jù)圖紙將橫梁，冷凝瓶固定架，冷凝瓶，蒸餾瓶安裝到儀器上，然后將循環(huán)水水管連接2.接通電源，將