二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)濕度(95%),來對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。 廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織,但是在體外培養(yǎng)時(shí),沒有任何保護(hù)自己的免疫屏障。對(duì)于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度、CO2 和濕度,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實(shí)驗(yàn)的需要。然而,針對(duì)培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中*的威脅實(shí)際上是污染問題。
二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源:細(xì)菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。
對(duì)于細(xì)胞來說,理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)*部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌關(guān)鍵!
細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色,對(duì)細(xì)胞生長影響明顯,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)。
病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,丟棄處理,相對(duì)來說*處理,對(duì)操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么*被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染*反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。
支原體:支原體污染后,因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長等,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。
非同種細(xì)胞:即細(xì)胞交叉污染,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無效。
因此,以上污染一旦發(fā)生,細(xì)胞*后基本只能丟棄,實(shí)驗(yàn)無法挽救,對(duì)于許多取樣困難的實(shí)驗(yàn)損失無法估量!
目前,二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。
高溫干熱空氣滅菌是目前世界公認(rèn)的*有效的滅菌技術(shù),能消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌);濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中,比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫一般至少需為100℃,細(xì)菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時(shí)以上才可被殺死;紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時(shí)間、強(qiáng)度、照射距離,濕度等,滅菌效果很難保證;消毒劑擦拭法是對(duì)表面滅菌的方法,適合于平整的表面如實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,而箱體內(nèi)部設(shè)計(jì)的死角、各種器件因無法擦拭等因素導(dǎo)致滅菌效果也很有限,而且含氯、碘的消毒劑對(duì)于不銹鋼有腐蝕作用,不能對(duì)不銹鋼箱體進(jìn)行擦拭滅菌。
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詞條
詞條說明
1. 設(shè)備放置:將低溫恒溫槽放置在穩(wěn)固的工作臺(tái)上,并確保周圍環(huán)境通風(fēng)良好,遠(yuǎn)離熱源和直射陽光。2. 檢查電源:確保電源連接正確,電壓符合設(shè)備要求,并具有良好的接地。3. 使用介質(zhì):根據(jù)設(shè)備要求選擇合適的冷卻介質(zhì),如去離子水、防凍液或制冷劑。4. 預(yù)熱和預(yù)冷:在使用前,可能需要對(duì)設(shè)備進(jìn)行預(yù)熱或預(yù)冷,以達(dá)到的工作狀態(tài)。5. 溫度設(shè)定:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求合理設(shè)定溫度,避免設(shè)置過低的溫度導(dǎo)致設(shè)備負(fù)荷運(yùn)行或介質(zhì)結(jié)
哪種恒溫?fù)u床培養(yǎng)菌種較好?哪種恒溫?fù)u床培養(yǎng)菌種較好?培養(yǎng)菌種的恒溫?fù)u床,有較大的恒溫振蕩空間,和較高的恒溫、恒濕精度,以及較寬調(diào)速范圍,才可滿足菌種的培養(yǎng)要求。推薦大容量臥式恒溫恒濕培養(yǎng)搖床,它具備多種功能和優(yōu)勢(shì),滿足你菌種培養(yǎng)和暗培養(yǎng)的生物領(lǐng)域。一、外殼:1、整機(jī)造型,靜電噴塑箱體,內(nèi)膽采用進(jìn)口不銹鋼鏡面板,大屏幕鋼化玻璃觀察窗,工作腔四角圓角設(shè)計(jì),便于清潔;2、開關(guān)采用凹陷設(shè)計(jì),美觀,運(yùn)輸途中
低溫恒溫槽使用時(shí)的正確操作流程。在槽內(nèi)加入液體介質(zhì),液體介質(zhì)液面不能低于工作臺(tái)板20mm。 液體介質(zhì)的選用:工作溫度低于8℃時(shí), 液體介質(zhì)一般選用酒精。工作溫度8至80度時(shí),液體介質(zhì)一般選用純凈水。工作溫度80至90度時(shí),液體介質(zhì)一般選用水油混合液。工作溫度高于90度時(shí),液體介質(zhì)一般選用油。插上電源,開啟“總電源”開關(guān),再開啟電源按鍵和循環(huán)按鍵。如工作溫度高于環(huán)境溫度,按設(shè)定功能鍵進(jìn)入溫度設(shè)定值設(shè)
雙功能振蕩器、回旋振蕩器、往復(fù)式振蕩器的區(qū)別
振蕩器用于衛(wèi)生防疫、環(huán)境監(jiān)測(cè)科研單位、大專院校及工礦企業(yè)等單位,化學(xué)分析及各種試樣混合均勻場(chǎng)合,還適用于生物化學(xué)做各種菌類培養(yǎng)振蕩使用,是非常常用的實(shí)驗(yàn)儀器,下面我就來為大家介紹雙功能振蕩器、回旋振蕩器、往復(fù)式振蕩器的區(qū)別。我們可以從工作方式上來看1、回旋振蕩振蕩器:顧名思義主要采用回旋振蕩的工作方式(這種工作方式也叫圓周振蕩),在水平面上360°的旋轉(zhuǎn)振蕩,如果以這種方式工作,被振蕩的液體在容器
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