(一) 準(zhǔn)備工作
1.在開始工作以前,要生物柜內(nèi)表面的污染。
2.將所有必需的物品置于柜內(nèi),以盡可能減少雙臂進(jìn)出**開口的次數(shù)。物品放置要注意以下幾點(diǎn):
①II級(jí)生物柜臺(tái)面**和后面的進(jìn)氣格柵不能被物品阻擋。
②所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺(tái)后部靠近工作臺(tái)邊緣的位置,并使其在操作中不會(huì)阻擋后部格柵。
③可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(如:混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品,應(yīng)該放在柜內(nèi)的某一側(cè)。
④潔凈的物品應(yīng)放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外,降低交叉污染的可能性。
⑤受紫外線損傷的實(shí)驗(yàn)樣本可以在紫外線殺菌后的實(shí)驗(yàn)之前放入。
⑥不要在工作區(qū)內(nèi)排放過(guò)多的物品。
3.關(guān)閉操作前窗,打開生物柜的紫外燈,對(duì)生物柜工作臺(tái)面,側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進(jìn)行殺菌處理。
4.稍微打開操作前窗,讓生物柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作。
(二) 操作注意事項(xiàng)
1.在使用生物柜時(shí)應(yīng)穿著個(gè)體防護(hù)服并戴手套防止被污染。在進(jìn)行一級(jí)和二級(jí)生物水平的操作時(shí),可穿著普通實(shí)驗(yàn)服。手套應(yīng)套在實(shí)驗(yàn)服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護(hù)目鏡。
2.在生物柜內(nèi),避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會(huì)對(duì)氣流產(chǎn)生影響,并且在處理?yè)]發(fā)性物品和易燃物品時(shí),也易造成危險(xiǎn)。在對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí),可以使用紅外線電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán)。
3.手和雙臂伸入到生物柜中等待大約1min,以便柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過(guò)”手和雙臂的表面以后,才可以開始對(duì)物品進(jìn)行處理。
4.工作時(shí),盡量減少手臂的移動(dòng),移動(dòng)時(shí)要緩慢,防止干擾柜內(nèi)氣流。在移動(dòng)雙臂進(jìn)出柜時(shí),需要小心維持**開口處氣流的完整性,雙臂應(yīng)該與工作區(qū)開口垂直地緩慢進(jìn)出**的開口。
5.在工作臺(tái)面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行,所有操作在工作臺(tái)面的中后部進(jìn)行。
6.工作時(shí),耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在柜內(nèi)不能拿出柜,否則在使用這些物品時(shí)雙臂就頻繁進(jìn)出柜,這樣會(huì)干擾柜空氣屏障的完整性,從而影響對(duì)人員和物品的防護(hù)。
7.一旦實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生溢灑物,用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
8.盡量使柜處于持續(xù)工作狀態(tài),并對(duì)所有物品進(jìn)行表面消毒處理,提供大程度的人員保護(hù)。從柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時(shí),要進(jìn)行表面消毒處理。
(三)使用完畢后的處理
1.系緊用過(guò)的生物廢物袋。
2.對(duì)柜內(nèi)壁、后壁、工作臺(tái)面和前窗內(nèi)側(cè)進(jìn)行清潔和消毒處理。
3.由于剩余的培養(yǎng)基可能會(huì)使微生物生長(zhǎng)繁殖,因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),包括儀器設(shè)備在內(nèi)的所有物品都應(yīng)表面污染,并移出柜。
4.從柜內(nèi)移出手臂之前,要進(jìn)行表面消毒處理,然后垂直于工作區(qū)開口緩慢地移出。
6.在每次使用后,要生物柜內(nèi)表面的污染。工作臺(tái)面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死柜里的任何微生物。在每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),應(yīng)擦拭生物柜的工作臺(tái)面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來(lái)表面的污染。在對(duì)目標(biāo)生物體有效時(shí),可以采用漂白劑溶液或70%酒精來(lái)消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,還用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭。
7.關(guān)閉前操作窗口并開啟紫外燈。
(四)生物柜內(nèi)溢灑的處理
處理溢灑物時(shí)不要將頭伸入柜內(nèi),也不要將臉直接面對(duì)前操作口,而應(yīng)處于前視面板的后方。選擇消毒滅菌劑時(shí)需要考慮其對(duì)生物柜的腐蝕性。
如果溢灑的量不足1 ml時(shí),可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。
如果溢灑量大或容器破損,建議按如下操作:使生物柜保持開啟狀態(tài);在溢灑物上覆蓋浸有消毒滅菌劑的吸收材料,作用時(shí)間以發(fā)揮消毒滅菌作用,必要時(shí),用消毒滅菌劑浸泡工作表面以及排水溝和接液槽;在柜內(nèi)對(duì)所戴手套消毒滅菌后,脫下手套;如果防護(hù)服已被污染,脫掉所污染的防護(hù)服后,用適當(dāng)?shù)南緶缇鷦┣逑幢┞恫课唬淮┖眠m當(dāng)?shù)膫€(gè)體防護(hù)裝備,如雙層手套、防護(hù)服、護(hù)目鏡和呼吸保護(hù)裝置等;小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到的收集袋或容器中,并反復(fù)用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩余物質(zhì)吸凈;破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理;用消毒滅菌劑擦拭或噴灑柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè);作用時(shí)間后,用潔凈水擦干凈消毒滅菌劑;如果需要浸泡接液槽,在清理接液槽前要先報(bào)告主管人員;可能需要用其他方式消毒滅菌后再進(jìn)行清理。如果溢灑物流入生物柜內(nèi)部,需要評(píng)估后采取適用的措施。
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詞條
詞條說(shuō)明
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