收購二手工業(yè)交換柱，二手DN400型交換柱優(yōu)勢

時間：2020-01-10

賣幾臺二手600型層析柱；買幾臺二手800型層析柱；高價收購二手DN400型

層析柱；回收二手500升層析柱。材料304/316L不銹鋼，柱管衛(wèi)生級，拆裝

方便;便于清洗和更換，上下過濾采用不銹鋼燒結(jié)網(wǎng)，上面配有液體分配器

，下面采用全面積滲透，篩網(wǎng)孔徑20μm。柱層析法的分離原理是根據(jù)物質(zhì)

在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物質(zhì)易被

硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附。當采用溶劑洗脫時，發(fā)生一

系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程，吸附力較強的組分，移動的距

離小，后出柱；吸附力較弱的組分，移動的距離大，先出柱。
硅膠柱層析流動相：
極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統(tǒng)；極性較大的用甲醇：氯仿系統(tǒng)；極性

大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統(tǒng)；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用極性相似相容原理，看流動相與固定相的極性，大部分是固

定相的極性小于流動相，然后流動相的極性與所要洗脫的物質(zhì)極性比較接

近，從而將物質(zhì)洗脫下來。

柱層析技術(shù)又稱柱色譜技術(shù)。在圓柱管中先填充不溶性基質(zhì)，形成一個固

定相。將樣品加到柱子上，用特殊溶劑洗脫，溶劑組成流動相。在樣品從

柱子上洗脫下來的過程中，根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中

分配系數(shù)不同，經(jīng)多次反復分配將組分分離。

原理：柱層析法的分離原理是根據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而使各組分

分離。一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被

硅膠吸附。當采用溶劑洗脫時，發(fā)生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸

的過程，吸附力較強的組分，移動的距離小，后出柱；吸附力較弱的組分

，移動的距離大，先出柱。

在分離分析特別是蛋白質(zhì)分離分析中，層析是相當重要、且相當常見的一

種技術(shù)，其原理較為復雜，對人員的要求相對較高，這里只能做一個相對

簡單的介紹。

一、吸附層析

1、吸附柱層析

吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以**溶劑或緩沖液為流動相構(gòu)成

柱的一種層析方法。

2、薄層層析

薄層層析是以涂布于玻板或滌綸片等載體上的基質(zhì)為固定相，以液體為流

動相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質(zhì)涂布于載體上形成

薄層，然后按紙層析操作進行展層。

3、聚酰胺薄膜層析

聚酰胺對極性物質(zhì)的吸附作用是由于它能和被分離物之間形成氫鍵。這種

氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時

，展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當?shù)恼箤?/span>

劑使分離在聚酰胺膜表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續(xù)過

程，就能導致分離物質(zhì)達到分離目的。
二、離子交換層析
離子交換層析是在以離子交換劑為固定相，液體為流動相的系統(tǒng)中進行的

。離子交換劑是由基質(zhì)、電荷基團和反離子構(gòu)成的。離子交換劑與水溶液

中離子或離子化合物的反應主要以離子交換方式進行，或借助離子交換劑

上電荷基團對溶液中離子或離子化合物的吸附作用進行。`
三、凝膠過濾
凝膠過濾又叫分子篩層析，其原因是凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，小分子物質(zhì)能進

入其內(nèi)部，而大分子物質(zhì)卻被排除在外部。當一混合溶液通過凝膠過濾層

析柱時，溶液中的物質(zhì)就按不同分子量篩分開了。
四、親和層析
親和層析的原理與眾所周知的抗原一抗體、激素一受體和酶一底物等特異

性反應的機理相類似，每對反應物之間都有一定的親和力。正如在酶與底

物的反應中，特異的廢物（S'）才能和一定的酶（E）結(jié)合，產(chǎn)生復合物（

E－S'）一樣。在親和層析中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具

有親和力，并產(chǎn)生復合物。而親和層析與酶一底物反應不同的是，前者進

行反應時，配體（類似底物）是固相存在；后者進行反應時，底物呈液相

存在。實質(zhì)上親和層析是把具有識別能力的配體L（對酶的配體可以是類似

底物、抑制劑或輔基等）以共價鍵的方式固化到含有活化基團的基質(zhì)M（如

活化瓊脂糖等）上，制成親和吸附劑M－L，或者叫做固相載體。而固化后

的配體仍保持束縛特異物質(zhì)的能力。因此，當把圍相載體裝人小層析柱（

幾毫升到幾十毫升床體積）后，讓欲分離的樣品液通過該柱。這時樣品中

對配體有親和力的物質(zhì)S就可借助靜電引力、范德瓦爾力，以及結(jié)構(gòu)互補效

應等作用吸附到固相載體上，而無親和力或非特異吸附的物質(zhì)則被起始緩

沖液洗滌出來，并形成了個層析峰。然后，恰當?shù)馗淖兤鹗季彌_ 液的PH值

、或增加離子強度、或加人抑③劑等因子，即可把物質(zhì)S從固相載體上解離

下來，并形成了*M個層析峰（見圖6－2）。顯然，通過這一操作程序就可

把有效成分與雜質(zhì)滿意地分離開。如果樣品液中存在兩個以上的物質(zhì)與固

相載體具有親和力（其大小有差異）時，采用選擇性緩沖液進行洗脫，也

可以將它們分離開。用過的固相載體經(jīng)再生處理后，可以重復使用。
上面介紹的親和層析法亦稱特異性配體親和層析法。除此之外，還有

一種親和層析法叫通用性配體親和層析法。這兩種親和層析法相比，前者

的配體一般為復雜的生命大分子物質(zhì)（如抗體、受體和酶的類似底物等）

，它具有較強的吸附選擇性和較大的結(jié)合力。而后者的配體則一般為簡單

的小分子物質(zhì)（如金屬、染料，以及氨基酸等），它成本低廉、具有較高

的吸附容量，通過改善吸附和脫附條件可提高層析的分辨率。
五、聚焦層析
聚焦層析也是一種柱層析。因此，它和另外的層析一樣，照例具有流

動相，其流動相為　多緩沖劑，固定相為多緩沖交換劑。
聚焦層析原理可以從PH梯度溶液的形成、蛋白質(zhì)的行為和聚焦效應三

方面來闡述。
1、PH梯度溶液的形成
在離子交換層析中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合儀實現(xiàn)的。例如

，當使用陰離子劑進行層析時，制備PH由高到低呈線性變化的梯度溶液的

方法是，在梯度儀的混合室（這層析柱者）中裝高PH溶液，而在另一室裝

低PH極限溶液，然后打開層析柱的下端出口，讓洗脫液連續(xù)不斷地流過柱

體。這時從柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低變化的。而在聚焦層析

中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，由于交換劑帶具有緩沖能力的電荷基

團，故PH梯度溶液可以自動形成。例如，當柱中裝陰離子交換劑PBE94（作

固定相）時，先用起始緩沖液（配方見表了一2）平衡到PHg，再用含PH6的

多緩沖劑物質(zhì)（作流動相）的淋洗液通過柱體，這時多緩沖劑中酸性的組

分與堿性陰離子交換對結(jié)合發(fā)生中和作用。隨著淋洗液的不斷加人，住內(nèi)

每點的PH值從高到低逐漸下降。照此處理J段時間，從層析柱**部到底部就

形成了PH6～9的梯度。聚焦層析柱中的PH梯度溶液是在淋洗過程中自動形

成的，但是隨著淋洗的進行，PH梯度會逐漸向下遷移，從底部流出液的PH

卻由9逐漸降至6，并恒定于此值，這時層析柱的PH梯度也就消失了。
2．蛋白質(zhì)的行為
蛋白質(zhì)所帶電荷取決于它的等電點（PI）和層析柱中的PH值。當柱中

的PH**蛋白質(zhì)的PI時，蛋白質(zhì)帶正電荷，且不與陰離于交換劑結(jié)合。而

隨著洗脫劑向前移動，固定相中的PH值是隨著淋洗時間延長而變化的。當

蛋白質(zhì)移動至環(huán)境PH**其PI時，蛋白質(zhì)由帶正電行變?yōu)閹ж撾姾?，并與

陰離子交換劑結(jié)合。由于洗脫劑的通過，蛋白質(zhì)周圍的環(huán)境PH 再次**PI

時，它又帶正電荷，并從交換劑解吸下來。隨著洗脫液向柱底的遷移，上

述過程將反復進行，于是各種蛋白質(zhì)就在各自的等電點被洗下來，從而達

到了分離的目的。
不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結(jié)合以前，移動

之距離是不同的，洗脫出來的先后次序是按等電點排列的。
工業(yè)化生產(chǎn)用層析柱，它涉及一種應用生物制藥、食品加工中的分離純化

設備，具體涉及一種新型工業(yè)化生產(chǎn)用層析柱。它能克服現(xiàn)有技術(shù)的弊端

，減少勞動力，降低勞動強度，降低成本。

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詞條
詞條說明
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