洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話

時(shí)間：2020-03-08作者：武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司瀏覽：58

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的**公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





甘蔗是的糖料作物,甘蔗黑穗病已成為世界性甘蔗主要病害,也是我國甘蔗栽培上較嚴(yán)重的真菌病害,挖掘甘蔗自身抗病基因?qū)共∮N有重要意義。植物病程相關(guān)蛋白(Pathogenesis Related Proteins,PRP/PRs)是在某種病理或病理相關(guān)環(huán)境條件下,植物體內(nèi)受誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異蛋白質(zhì),其在植物抗病反應(yīng)中起重要作用,與植物系統(tǒng)獲得性抗性(systemic acquiredresistance,SAR)密切相關(guān)。β-1,3-葡聚糖酶屬于典型的PR2蛋白,可水解許多種真菌細(xì)胞壁的主要成分β-1,3-葡聚糖,在植物抵御真菌病原的防衛(wèi)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。本研究在甘蔗響應(yīng)黑穗病菌侵染的表達(dá)譜分析的基礎(chǔ)上,選擇與防衛(wèi)蛋白相關(guān)的差異表達(dá)基因序列,利用電子,結(jié)合RT-PCR和基因?qū)嶒?yàn)技術(shù),以高抗黑穗病的甘蔗無性系Ya05-179為實(shí)驗(yàn)材料,擴(kuò)增獲得甘蔗β-1,3-葡聚糖酶家族基因的2個(gè)成員,并命名為ScBG1和ScBG2。生物信息學(xué)分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長1 175bp,編碼332個(gè)氨基酸,含有1個(gè)長度為156bp的內(nèi)含子;ScBG2基因DNA序列全長1 820bp,編碼392個(gè)氨基酸,含2個(gè)長度分別為156bp和973bp的內(nèi)含子;上述2個(gè)基因核酸序列的同源性為39.58%,均屬于糖基水解酶*十七家族。








選取含有氯嘧磺隆抗性標(biāo)記的ILV1基因和報(bào)告基因GFP二元載體的農(nóng)AGL-1，采用單因子和雙因子方法研究根癌農(nóng)AGL-1介導(dǎo)柱花草菌CH008轉(zhuǎn)化過程中各主要因素對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響，優(yōu)化構(gòu)建ATMT轉(zhuǎn)化柱花草膠孢菌體系條件，使轉(zhuǎn)化效率達(dá)到300～400個(gè)轉(zhuǎn)化子/106個(gè)孢子，即根癌農(nóng)AGL-1濃度OD600=0.8，菌分生孢子濃度為1×106個(gè)/mL，AS濃度為100 μmol/L，誘導(dǎo)時(shí)間為6 h，共培養(yǎng)溫度和時(shí)間分別為25 ℃和4 d。經(jīng)PCR檢測都有GFP片段，并能夠表達(dá)綠色熒光蛋白。這為進(jìn)一步開展菌對(duì)柱花草的致病機(jī)理研究提供了依據(jù)，優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系有利于后續(xù)突變體庫的擴(kuò)大、篩選突變體和致病功能基因的研究。



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為建立根癌農(nóng)介導(dǎo)的香蕉高效遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，本研究以雄性花誘導(dǎo)產(chǎn)生的貢蕉胚性懸浮系為轉(zhuǎn)化受體，從潮篩選濃度和篩選方法兩方面進(jìn)行了優(yōu)化。研究結(jié)果表明，貢蕉懸浮系在M2液體培養(yǎng)下潮的適合篩選濃度為5mg/L。將液體共培養(yǎng)7d后的貢蕉胚性懸浮系轉(zhuǎn)接到M2液體篩選培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，每10d繼代一次。GUS組織染色表明，經(jīng)過3代抗性篩選的ECS幾乎全為轉(zhuǎn)化細(xì)胞。經(jīng)過3個(gè)月的胚誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得成熟抗性體細(xì)胞胚，平均抗性體細(xì)胞胚得率為4580個(gè)／mLPCV。同時(shí)，轉(zhuǎn)化苗的PCR檢測結(jié)果表明，gus基因已整合到貢蕉基因組中。本研究表明液體篩選系統(tǒng)有利于轉(zhuǎn)化胚性懸浮細(xì)胞的增殖，大大地提高了香蕉轉(zhuǎn)基因的轉(zhuǎn)化效率。



武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司專注于動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)等

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